目的:建立胶原蛋白凝胶包埋3D培养肿瘤药敏检测体系（CD-DST）,探讨该体系在胰腺癌细胞药敏检测中的可靠性,进一步探讨该体系在胰腺癌临床治疗中的应用价值,为胰腺癌患者术后化疗方案的选择提供指导性作用。方法:1.首先建立细胞3D培养体系,将I型胶原蛋白溶液、10X DMEM培养基、1nmol/L NaOH溶液混合,制作PH及渗透压均适于细胞生长的凝胶滴。2.通过检测包埋不同数量细胞的胶滴图片的OD值,探讨胶滴内细胞数量与胶滴图片OD值之间的关系。3.观察人胰腺癌细胞系MiaPaca 2在凝胶滴中的形态、生长率。4.检测药物敏感性不同的细胞株在此体系中的药物敏感性差异。5.收集南京医科大学第二附属医院胰腺中心2017年11月-2018年5月中9例行胰腺切除术患者的手术切除标本;利用酶消化法提取肿瘤组织原代细胞,运用上述体系对肿瘤组织原代细胞进行体外药敏实验研究,每个肿瘤标本分别进行氟尿嘧啶及吉西他滨的药物敏感性测定。结果:1.建立了稳定的胶滴3D培养体系,该体系下胶滴图片OD值与胶滴中细胞数量呈线性关系。2、MiaPaca 2细胞在该体系中呈形状各异的球形,足突向外周伸出,呈毛刺状;培养6天后可见细胞抱团生长。3.2D、3D培养条件下,吉西他滨对MiaPaca 2和MiaPaca 2/GZ细胞的IC₅₀浓度分别为0.035μM、0.15μM和0.12μM、0.64μM;氟尿嘧啶对MiaPaca 2细胞的IC₅₀浓度分别为31.4μM和89.4μM。4.最终入组的9例标本中有7例标本的原代细胞提取成功并进行了药敏检测,标本可评价率为77.8%,不同患者来源的原代细胞对抗肿瘤药物的敏感性不同。结论:1.本研究使用I型胶原蛋白构建了结构稳定的细胞3D培养体系,在该体系中,细胞生长良好,可应用于后续的分子水平和细胞水平的相关研究。2.基于此体系的CD-DST技术能够检测出具备不同耐药性的细胞对抗肿瘤药物敏感性的差异。3.基于此体系的CD-DST技术能够较好地反应胰腺癌患者对抗肿瘤药物敏感性地个体差异,成本较低,具有较好地临床应用价值。其在胰腺癌患者个体化治疗中的应用价值,值得后续临床研究进一步验证。