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犬瘟热(Canine Distemper)是由犬瘟热病毒(Canine Distemper Virus，CDV)引起的一种犬烈性传染病。患犬以支气管炎、卡他性肺炎、胃肠炎和神经症状为发病特征。犬细小病毒(Canine Parvovirus，CPV)是引起犬细小病毒病(Canine ParvovirusDisease)的病原，临床症状以急性胃肠炎、出血性肠炎、心肌炎和白细胞减少为特征。目前犬瘟热和犬细小病毒病广泛存在于养犬国家和地区，其感染率高，发病率高，死亡率高，严重危害犬群。患犬发病症状多样，常造成误诊、漏诊，需要与多种疾病鉴别诊断。 为了解近年CDV和CPV在本地区的感染情况，本研究在广州地区抽样调查5所动物医院在2011年3月至2012年2月犬瘟热和犬细小病毒病发病季节、年龄和免疫情况等信息。结果显示，5所动物医院在调查时间内门诊病例共5234例，进行犬瘟热和/或犬细小病毒病检测共587例，占门诊病例总量11.21％。其中CDV检测共422例，阳性感染有172例，发病率为3.29％，检出率为40.76％；CPV检测共386例，阳性感染有211例，发病率4.03％，检出率为54.66％。在587例患犬中有20例为CDV和CPV混合感染，占3.41％。调查发现，CDV和CPV一年四季均可发生，但冬季12、1、2月份是高发期，尤其CDV在冬季发病显著高于其他季节。CDV和CPV感染主要集中在6月龄以下的幼犬，分别有128例和166例该年龄段的感染样品，占发病总数74.42％和78.67％。此外，免疫不全和免疫完全的犬仍然可以感染CDV和CPV，分别占阳性病例的73.84％和75.83％。 本研究根据CDV和CPV基因序列设计特异性引物，通过优化反应体系和扩增条件，分别建立了能够检测CDV和CPV的荧光定量PCR方法。两者检测下限均是1×101拷贝/μL，该法敏感性均比常规PCR方法高100倍。CDV和CPV荧光定量PCR的相关系数是1.000和0.990，各浓度组间相关性非常好。CDV和CPV标准品4个浓度组内变异系数在0.82％-2.46％之间，组间变异系数在1.11％-5.11％之间。应用该方法分别对CDV或CPV发病症状明显的疑似患犬各10例采集其样本，分为唾液泪液组、血液组和粪便组，分析不同采样部位对检出率的影响。其中CDV病例泪液唾液组和血液组检出率显著高于粪便组，CPV病例各组检出率差异不显著，但粪便组和血液组检出率略比唾液泪液组高。该方法的建立为宠物烈性传染患犬瘟热和犬细小病毒病的检测提供了有效手段，该方法特异性和敏感性较好，能够应用于宠物临床检测。