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背景:强直性脊柱炎(Ankylosing Spondylitis,AS)是一种起病隐匿的,慢性炎症性自身免疫病,随着病情进展伴有不同程度的皮肤黏膜、眼、心脏、肺、胃肠道、肾等多系统损害。本病在中医学中属于“大偻”范畴。由于生活环境及生活方式的不断变化,AS的发病率呈现上升的趋势,中医辨证治疗AS在缓解炎症、减轻疼痛、改善关节功能等方面有明显优势。AS的证候规范化研究对于规范辨证论治、提高临床疗效、推动临床科研工作的开展具有重要意义。目的:通过分析中文四大数据库近20年AS相关现代文献,探索AS中医证候、证素分布规律及方剂使用情况;回顾分析1572例次AS临床病历资料,探究其临床证候分布规律,为进一步完善本病的证候规范化研究提供依据;在以上文献及临床研究的基础上,基于网络药理学探索以补肾法为主立法组方的补肾强脊汤治疗强直性脊柱炎的分子机制,为临床诊治强直性脊柱炎提供新的思路和方法。方法:研究一:计算机检索中国知网期刊全文数据库(CNKI)、维普中文期刊数据库、万方数据库、中国生物医学文献服务系统(CBM)自建库以来至2021年12月关于AS中医证型、方剂相关文献,提取证型、证素、方剂、病例数等基本信息并进行频次、频率、构成比分析,分别探索临床研究类文献、专家经验及探讨类文献中AS中医证候、证素应用特点,及所有纳入文献中方剂的临床使用特点。研究二:收集2006年1月至2010年1月由中国中医科学院广安门医院临床医生建立的AS临床病历510份,共510例AS患者,1572诊次;采用回顾性研究的方法,采集患者的姓名、年龄、性别、证型等信息。运用SPSS20.0等软件分析本病临床上的证型分布规律。研究三:利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)收集补肾强脊汤的主要化学成分及靶点,通过Genecards,Disgenet,TTD数据库获取AS的主要靶点,并借助STRING平台构建蛋白互作网络;采用Metascape平台进行GO功能富集分析和KEGG信号通路分析,明确补肾强脊汤治疗AS的核心靶点及作用机制。结果:1.强直性脊柱炎中医证候、证素及方剂分布规律的文献研究1.1收集符合纳入标准的文献共812篇,其中期刊论文605篇、学位论文150篇,会议论文57篇,纳入文献的发表日期范围在2000-2021年间,尤以近10年居多;包含明确证候类型且证候类型>2中的文献共计236篇,其中临床研究类文献140篇,专家经验及理论探讨类文献96篇。临床研究类文献中包含研究病例数的文献共88篇,涉及16828例强直性脊柱炎患者。1.2 140篇临床研究类文献中常用中医证型诊断标准共12种,使用频率最高的证候标准为《中药新药临床指导原则》;证候分布中频次最多的为肾督亏虚证(99次,18.28%)、湿热痹阻证(99次,16.27%)、肝肾不足证(73次,13.35%)、寒湿痹阻证(57次,10.42%)及瘀血痹阻证(41次,7.5%),其辨证方法以病因辨证、脏腑辨证为主;在证素分布方面,频率在5%以上的病位证素分别是肾(216次,47.16%)、督脉(111次,24.24%)、肝(93次,20.31%),频率在5%以上的病性要素分别是湿(193次,33.74%)、热(146次,25.52%)、瘀血(96次,16.78%)、寒(72次,12.59%),其证素组合形式多以两病性证素、两病位证素组合为主。共涉及16828例AS患者,其中病例数构成比最高的为肾督亏虚证(6894例,40.97%),依次为湿热痹阻证(2530例,15.03%)、肝肾不足证(1231例,7.32%)、肾虚湿热证(965例,5.73%)、寒湿痹阻证(900例,5.35%)。1.3 96篇专家经验、探讨类文献中,共涉及名医名家44人;在证候分布方面,证候分布频率为高的为肾督亏虚证(67次,频率15.73%)与肝肾不足证(67次,频率15.73%),其次为湿热痹阻证(58次,频率13.62%)、寒湿痹阻证(35次,频率8.22%)、痰瘀痹阻证(31次,频率7.28%)、瘀血痹阻证(25次,频率5.87%),辨证方法以病因辨证和脏腑辨证为主;在证素分布方面,频率在5%以上的病位证素分别是肾(153次,43.84%)、督脉(83次,23.78%)、肝(76次,21.78%),频率在5%以上的病性要素分别是湿(142 次,29.58%)、热(97 次,20.21%)、瘀血(79 次,16.46%)、寒(67次,13.96%),其证素组合形式多以两病性证素、两病位证素组合为主。1.4涉及方剂的文献669篇,内含经典方剂78首,按照频次多少依次为独活寄生汤、四妙丸/散、阳和汤、身痛逐瘀汤、六味地黄丸、金匮肾气丸、乌头汤、右归丸等;合方42首,累计频次57次,合方中多以四妙丸、独活寄生汤、右归丸、青娥丸、左归丸、乌头汤、身痛逐瘀汤作为基本方。2.1572例次强直性脊柱炎证候分布的回顾性分析2.1本研究纳入1572例次AS病历数据,男女比例约为4.17:1。年龄构成在7岁-82岁之间,平均年龄为32.18±9.53岁。2.2肾督亏虚证出现总频次为740,湿热痹阻证总频次为641,瘀血痹阻证总频次为722,肝肾不足证总频次为195,寒湿痹阻证总频次为127;其中肾督亏虚证与湿热痹阻证主要以主证的形式存在,瘀血痹阻证以兼证形式与肾督亏虚证、湿热痹阻证相互兼夹。2.3证候存在形式以复合证候和单证存在为主,以单证存在者有767例,占比48.79%,单一证候出现频率最高的为肾督亏虚证,其次为湿热痹阻证、肝肾不足证、瘀血痹阻证及寒湿痹阻证。复合证候(包括二证组合及三证组合)者共805例,占比51.21%,复合证候常见组合形式为肾虚血瘀证、湿热瘀阻证、肾虚湿热证、肝肾不足+湿热痹阻证、肾虚寒湿证。3.基于网络药理学探讨补肾强脊汤治疗强直性脊柱炎的机制3.1补肾强脊汤有58个活性成分,核心活性成分为槲皮素(quercetin)、山奈酚(kaemmpferol)、豆甾醇(stigmasterol),核心靶点有 IL-6、CXCL8、RELA、IL-1B、CCL2、IL-10、IL-4、IFENG、CXCL10、IL-2 等。3.2补肾强脊汤治疗AS的生物学通路主要作用于IL-17信号通路、AGE-RAGE信号通路、流体剪切应力和动脉粥样硬化等通路。结论:1.AS核心证候为肾督亏虚证、湿热痹阻证,瘀血痹阻证常以兼夹证候存在;肾虚血瘀证、湿热瘀阻证、肾虚湿热证为常见复合证候。2.肾、督脉是AS的主要病位证素,湿、热、瘀为AS主要的病性证素,湿热为标,尤以湿邪为主,瘀血为关键病理因素;证素组合以两病位证素与两病性证素组成形式多见,如肾督亏虚证、湿热痹阻证。3.中医治疗AS重在补肾强督,活血化瘀贯穿始终;临床经典方剂以独活寄生汤、四妙散、金匮肾气丸、阳和汤、身痛逐瘀汤等方剂为主,自拟方中以补肾类方剂居多,说明肾督亏虚证为本病的主要核心基本证候。4.以补肾为主立法组方的补肾强脊汤主要通过IL-17信号通路,作用于IL-6、CXCL8、RELA、IL-1B、CCL2、IL-10等靶点协同作用治疗AS。