【摘 要】
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目的:探讨调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)在肥胖早期阶段的变化及其对内脏脂肪巨噬细胞亚型的调节作用。 方法:将4周龄的C57BL/6雄性小鼠,喂以含60%脂肪的高脂饮食造成
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目的:探讨调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)在肥胖早期阶段的变化及其对内脏脂肪巨噬细胞亚型的调节作用。 方法:将4周龄的C57BL/6雄性小鼠,喂以含60%脂肪的高脂饮食造成早期肥胖模型。每周检测小鼠的体重和血糖。分别在小鼠4周龄、10周龄和20周龄时处死小鼠,取血及附睾旁脂肪、脾脏和肝脏待用。用ELISA检测小鼠血清中瘦素、胰岛素水平;肝脏油红O染色观察小鼠肝脏脂肪浸润程度;流式计数方法检测脾脏内Treg细胞、脂肪组织内经典诱导型巨噬细胞(M1型)和条件活化型巨噬细胞(M2型)巨噬细胞的数量;用realtime-PCR的方法测量脂肪组织内单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的水平。同时,将高脂喂养的肥胖小鼠随机分为雷帕霉素处理组和对照组,观察雷帕霉素刺激Treg后对小鼠体重、附睾旁脂肪重量、血糖、血清胰岛素和瘦素水平、脂肪组织内巨噬细胞亚型的影响。 结果:①C57BL/6小鼠在20周龄时成功建成早期肥胖模型。与正常饮食组小鼠相比,高脂喂养20周龄小鼠的体重(39.05 g±2.33 gvs31.65 g±1.20 g,P<0.05),附睾旁脂肪重量(2.12 g±0.48 g vs0.36g±0.09 g,P<0.05),血清瘦素水平(13.57 ng/ml±3.44 ng/ml vs4.52 ng/ml±0.60 ng/ml,P<0.05)明显增加,油红O染色显示高脂喂养组肝脏脂肪浸润明显;但两组间小鼠的胰岛素水平(1.65 ng/ml vs1.39 ng/ml,P>0.05)和血糖(8.8 mmol/L vs9.3 mmol/L,P>0.05)无显著性差异;提示该小鼠处于早期肥胖阶段,在内脏脂肪重量增加的同时未发生胰岛素抵抗和糖尿病。②与正常饮食相比,高脂喂养组小鼠附睾旁脂肪组织内的巨噬细胞数量增加,从4周龄、10周龄和20周龄小鼠的巨噬细胞比例逐渐增加,分别为的2.36%、8.36%和21.15%;4周龄、10周龄和20周龄小鼠的M1/M2巨噬细胞比例亦有增加趋势,分别为0.28、1.80和1.37;同时伴有附睾旁脂肪MCP-1的表达增加,从4周龄的0.69、10周龄的1.70到20周龄的10.96。③高脂饮食组小鼠的脾脏Treg比例呈下降趋势,在4周龄、10周龄和20周龄分别为6.40%±0.28%、4.93%±0.71%、4.73%±3.66%。④雷帕霉素干预小鼠相对于对照小鼠可使脾脏内Treg细胞数量显著性增加,从3.22%增加至15.30%。与对照组相比,雷帕霉素增加脾脏内Treg数量后,干预组的体重(27.08 g±0.79 g vs38.00 g±4.74 g,P<0.05),附睾旁脂肪重量(0.96 g±0.09 g vs2.05 g±0.52 g,P<0.05),血清瘦素水平(2.14 ng/ml±0.86 ng/ml vs13.90 ng/ml±2.56 ng/ml, P<0.05),血糖(8.15mmol/L±0.91 mmol/L vs12.15mmol/L±0.47 mmol/L,P<0.05)均呈显著性下降,同时伴有雷帕霉素干预组附睾旁脂肪组织M1/M2巨噬细胞比例从0.98±0.63下降至0.48±0.39。 结论:肥胖早期阶段中调节性T细胞数量的下降可能与内脏脂肪内巨噬细胞的浸润及亚型分布异常有关。
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