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第一部分豚鼠Ⅱ型前庭毛细胞存在功能性m2胆碱能受体目的研究豚鼠Ⅱ型前庭毛细胞上BK电流的胆碱能受体特性。方法应用全细胞膜片钳技术检测单离豚鼠前庭Ⅱ型毛细胞ACh激活的BK电流对不同胆碱能受体及其亚型的激动剂和拮抗剂的反应特性。结果①细胞外应用BK通道阻滞剂iberiotoxin (IBTX)200nM可强力阻断ACh激活的外向电流；②细胞外应用传统的N型胆碱能受体拮抗剂美加明(mecamylamine, MLA)和alpha9-N型胆碱能受体拮抗剂士的宁(strychnine)对此电流没有阻断作用；③细胞外应用ml-4亚型M受体拮抗剂,发现此电流对m2型选择性胆碱能受体拮抗剂methoctramine敏感,而对m1型选择性胆碱能受体拮抗剂pirenzepine、m3型选择性胆碱能受体拮抗剂4-DAMP和m4型选择性胆碱能受体拮抗剂tropicamide不敏感；④在同一Ⅱ型毛细胞上,传统的M型胆碱能受体激动剂Carbamyl-β-methylcholine chloride (CCh)和m2型胆碱能受体特异性激动剂Arecaidine propargyl ester (APE)均能激活Ⅱ型前庭毛细胞ACh-敏感性BK电流,且对m2型选择性胆碱能受体拮抗剂methoctramine敏感,可以被methoctramine强力阻断。结论Ⅱ型前庭毛细胞BK型胆碱能传出抑制由m2型胆碱能受体介导。第二部分豚鼠Ⅱ型前庭毛细胞m2mAChR介导的胆碱能抑制的细胞内信号转导机制目的研究豚鼠Ⅱ前庭毛细胞m2AChR介导BK型胆碱能抑制的细胞内信号转导机制。方法应用全细胞膜片钳技术,检测Ⅱ前庭毛细胞ACh敏感性BK电流对细胞内信号转导相关试剂的反应特性。结果①Ⅱ型前庭毛细胞内透析G蛋白激动剂GTPyS,可以激活ACh-敏感性BK电流,细胞外应用Gi蛋白α亚单位抑制剂GAPnt-2对ACh-敏感性BK电流没有阻断作用,细胞内透析pertussis toxin (PTX)可以明显阻断Ⅱ前庭毛细胞ACh敏感性BK电流,此结果提示Gi蛋白βγ亚单位二聚体在此信号转导中起主要作用；②细胞外应用cAMP膜可渗透性类似物db-cAMP可激活与ACh敏感性BK电流类似的电流,同时ACh敏感性BK电流亦能够被AC特异性阻断剂2,5-dd-Ado明显阻断,提示AC/cAMP参与了该电流的细胞内信号转导。结论M2型胆碱能受体与细胞内Gi蛋白偶联,通过激活Gi蛋白βγ亚单位二聚体-AC/cAMP-PKA通路介导的钙离子通道蛋白质磷酸化使Ca2-内流,引起BK通道开放,细胞内K+外流,从而导致Ⅱ型前庭毛细胞超级化。