【摘 要】
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目的:探讨γ-分泌酶抑制剂DAPT阻断Notch信号通路对高表达Notch的人宫颈癌HeLa细胞系增殖和凋亡的影响及其机制。
方法:体外培养人子宫颈癌HeLa细胞;MTT法检测不同浓度D
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目的:探讨γ-分泌酶抑制剂DAPT阻断Notch信号通路对高表达Notch的人宫颈癌HeLa细胞系增殖和凋亡的影响及其机制。
方法:体外培养人子宫颈癌HeLa细胞;MTT法检测不同浓度DAPT对HeLa细胞增殖的抑制作用;倒置显微镜下观察不同浓度DAPT对HeLa细胞形态影响;流式细胞术结合AnnexinV-FITC/PI双染分析不同浓度DAPT对HeLa细胞凋亡的影响;RT-PCR法检测HeLa细胞Notch1、HES1基因表达情况。
结果:不同浓度的DAPT作用于HeLa细胞后,细胞增殖水平明显下降(P＜0.05),在浓度为1.0μmol/L时即出现抑制细胞生长的作用,随着DAPT浓度的增大其抑制效果明显增强,呈显著的浓度依赖关系。细胞凋亡结果分析表明,DAPT能够诱导HeLa细胞发生凋亡,且凋亡的诱导程度与给药浓度有关。RT-PCR显示随着DAPT量的增加,Notch1、HES1mRNA的表达逐渐下降。
结论:
1.DAPT能抑制体外培养的人宫颈癌HeLa细胞增殖,这种抑制作用在一定范围内具有剂量时间依赖性。
2.DAPT能诱导体外培养的人宫颈癌HeLa细胞凋亡。
3.DAPT对HeLa细胞抑制增殖和诱导凋亡的作用可能与HeLa细胞中Notch1、HES1mRNA的下调有关。
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