家蝇免疫相关基因的克隆和表达研究

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昆虫具有独特的高效的非特异性免疫防御系统,包括外源病原微生物的识别和随后的细胞免疫(cellular immune)和体液免疫(humoral immune)反应的激活.细胞免疫主要是由血细胞介导的吞噬、结节和包被作用.体液免疫不同于高等动物,而是基于初级和二级免疫应答.初级免疫应答是血淋巴中蛋白水解级联反应,即昆虫受到伤害刺激后引起的迅速的免疫应答,包括血液凝集反应和酚氧化酶级联反应;二级免疫应答是接受刺激后昆虫体内防御性蛋白的快速转录激活,例如,合成的大量的抗菌肽或多肽.另一方面,昆虫与其他脊椎动物相比更容易受到氧胁迫,因此昆虫在长期的发展进化过程中也发展了一套高效的抗氧化系统,其保护酶系统具有很强的调节能力,这也反映了昆虫对环境适应能力.家蝇作为一种重要的昆虫资源,对其强大高效的免疫系统和抗氧化系统的深入研究具有重要的理论意义和应用价值.该研究从家蝇免疫相关基因的克隆着手,采用同源克隆的策略(Homology Cloning Strategy),结合cDNA末端快速扩增技术(Rapid Amplification of cDNA Ends,RACE)克隆了家蝇攻击素(Attacin)(GenBank登录号:AY460106),超氧化物歧化酶(SOD)(GenBank登录号:AY460107)和酚氧化酶原(PPO)(GenBank登录号:AY494738)3个基因的全长cDNA编码序列,并对相关序列进行了较为全面的生物信息学分析,同时应用半定量RT-PCR的方法对相关基因的表达进行了初步的探索.该研究工作为家蝇免疫相关基因的功能和作用机理及其在家蝇免疫体系中的作用的研究奠定了理论基础,并且为今后进一步开发相关基因应用于生产提供理论依据.
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