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脂类作为主要的营养元素之一,是鱼体的重要组成成分,对鱼类具有重要的生物学功能。鱼类从食物中摄取营养物质和能量,并主要在肝脏和脂肪组织中把多余的能量转变成脂肪储存起来。肝脏中脂肪的合成需要脂肪酸为底物前体,并通过一系列酶促反应来完成,而脂肪酸大多来自脂肪酸的重新合成,这一过程需要脂肪酸合成酶(Fatty acid synthetase,FAS),合成的脂肪酸经过酯化作用后,变成甘油三酯(Triglyceride,TG)、磷酸酯、胆固醇酯等,然后由脂蛋白转运至其它组织中再利用或在脂肪组织中贮存。在脂肪酸的全程合成过程中,FAS是反应的限速酶,因此,FAS蛋白的多寡、活性的高低对控制动物体脂沉积具有重要意义。 鱼类在饥饿条件下,为了维持生命活动的能量需要,其代谢机能发生改变,通过调节体内各种酶的活性,改变体内生化组成,以达到积极利用体内贮存的能量物质来满足生命活动的需要。此外,在正常生理条件下,鱼类摄入的饵料成分也能改变其体内生化组成和各种酶的活性。 本文以草鱼为试验材料,应用生化和分子生物学试验技术,研究饥饿和不同脂肪源对草鱼体脂含量和FAS活性及其基因表达的影响,为鱼类营养、能量代谢、酶学等方面提供相关理论资料。研究主要结果如下: 1.饥饿对草鱼体脂含量和FAS活性的影响 以草鱼为试验材料,进行28d饥饿处理,研究了肌肉和肝脏中脂肪含量和FAS活性变化,结果表明:肌肉和肝脏组织中脂肪含量均下降。肌肉中脂肪含量由初始的2.45%降低到1.43%;肝脏中脂肪含量由初始的3.01%降低到1.73%;肝脏中脂肪含量比肌肉中下降高出0.26%。同时在饥饿处理过程中,草鱼的脂肪含量出现3个变化阶段:第一阶段(0d-14d),肌肉和肝脏中脂肪含量呈平稳下降趋势,平均下降0.01%d-1和0.03%d-1;第二阶段(14d-21d),肌肉和肝脏中脂肪含量下降明显,平均下降0.11%d-1和0.10%d-1;第三阶段(21d-28d),肌肉和肝脏中脂肪含量又呈平稳下降趋势,平均下降0.01%d-1和0.03%d-1。在饥饿处理过程中,草鱼肌肉和肝脏组织中FAS活性均下降:肌肉中FAS活性由初始的1.31U/mg降低到0.33U/mg;肝脏中FAS活性由初始的2.18U/mg降低到0.62U/mg;肝脏中FAS活性下降量比肌肉中下降量高0.58 U/mg。草鱼FAS活性下降过程可分4个阶段:第一阶段(0d-7d),肌肉和肝脏中FAS活性快速下降,平均下降0.03U/mgd-1和0.05U/mgd-1;第二阶段(7d-14d),FAS活性平稳下降,肌肉和肝脏FAS活性平均下降0.02U/mgd-1;第三阶段(14d-21d),FAS活性又呈快速下降趋势,肌肉和肝脏中FAS活性平均下降0.05U/mgd-1和0.11U/mgd-1;第四阶段(14d-28d),FAS活性下降又呈减缓趋势,肌肉和肝脏中FAS活性平均每天下降0.04U/mgd-1,但肌肉中FAS活性下降仍比第一、二阶段下降明显。