为了分别探讨靶向CD19分子和CD138分子的嵌合抗原受体修饰的T细胞(CD19/CD138-CAR-T)与未被基因修饰的T细胞相比,是否可以提高对CD19+的套式淋巴瘤细胞和CD138+骨髓瘤的杀伤率。我们通过基因合成和分子克隆手段构建CD19/CD138-CAR片段,将CD19/CD138-CAR片段分别克隆到慢病毒载体上,然后用慢病毒对T细胞进行转染。利用PCR、蛋白免疫印迹术、流式细胞术检测目的蛋白在T细胞上的表达。最后用流式细胞术检测T细胞对肿瘤细胞的杀伤效果。结果发现未被CAR基因修饰的T细胞对CD19阳性的Jeko-1、Rec-1、Maver-1细胞的杀伤效率分别为30%、17%和32%,而CD19-CAR-T细胞对上述3种肿瘤细胞的杀伤效率分别为78%、60%和75%;未被基因修饰的T细胞对CD138阳性的U266和8226细胞的杀伤率分别为10%和38%,而CD138-CAR-T细胞对上述2种肿瘤细胞的杀伤率分别为43%和86%。得出结论为经CD19/CD138嵌合抗原体受体修饰的T细胞可特异性识别CD19/CD138分子,对CD19/CD138阳性的肿瘤细胞的杀伤效率显著高于未被基因修饰的T细胞,显示出CAR-T在免疫治疗中具有巨大潜力。为了得到兼具细胞毒杀伤毒性和在体外长期维持活性的中央记忆T细胞,我们选用Persongen aAPC以及IL-7对CAR-T细胞进行扩增。