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本试验旨在研究在饲粮中不同比例葡萄籽对多浪羊营养物质表观消化率、消化道组织结构、肠道细菌以及真菌菌群结构的影响。选取25只3月龄体重18.5±2.65kg健康多浪羊为试验动物,随机分为5组,每组5只羊,每只羊为1个重复,试验羊单栏饲养。试验共75天,其中预饲期15d,正饲期60d。饲养试验结束前10天使用粪袋进行消化试验,测定营养物质表观消化率;饲养试验结束后试验羊全部屠宰,取瘤胃、十二指肠、空肠、回肠组织样,用于组织切片制作,观察消化道组织形态结构的变化;同时采集十二指肠肠道内容物两份,一份用于测定细菌菌群结构,另一份用于测定真菌菌群结构,通过三代微生物测序技术测定分析肠道微生物菌群多样性以及丰富度。通过对多浪羊营养物质表观消化率、消化道组织形态结构的变化,十二指肠肠道细菌真菌菌群结构的数据进行对比分析,探索饲粮中不同比例葡萄籽对多浪羊消化道组织形态结构和肠道菌群的影响,为提高葡萄籽资源在反刍动物饲料中的高效应用提供参考依据。试验一:饲粮中不同比例葡萄籽对多浪羊营养物质表观消化率的影响本试验旨在验证本课题组前期研究饲粮中葡萄籽适宜的添加量。选取25只3月龄体重18.5±2.65kg的健康多浪羊为试验动物,随机分为5组,每组5只羊,每只羊为1个重复,试验羊单栏饲养。饲粮中葡萄籽添加比例分别为0%（对照组,A）、4%（B）、8%（C）、12%（D）、16%（E）。预饲期15 d,正试期60 d。饲养试验结束前10 d每组选取3只健康、体重接近平均值的多浪羊,用粪袋采集粪便,预饲5 d,采样6 d。结果表明:A组干物质表观消化率显著高于E组（P＜0.05）,与B、C、D之间均无显著性差异（P＞0.05）;各组之间粗脂肪（EE）表观消化率差异不显著（P＞0.05）;A组、B组粗蛋白质（CP）表观消化率显著高于E组;NDF表观消化率组间差异显著,A,B组NDF表观消化率显著高于D,E组;ADF表观消化率各组差异不显著（P＞0.05）。小结:本试验研究结果与本课题组前期试验结果相似,饲粮中葡萄籽适宜添量建议在8%左右,超过12%将会显著抑制干物质,粗脂肪和NDF的表观消化率。试验二:饲粮中不同比例葡萄籽对多浪羊消化道组织形态结构的影响本试验旨在研究饲粮中不同比例葡萄籽对多浪羊消化道组织形态结构的影响。试验设计和试验羊饲养管理同试验一。饲养试验结束后试验羊进行屠宰,取瘤胃、十二指肠、空肠及回肠组织样。结果表明:各组间羊只瘤胃重与复胃重均无显著差异影响（P＞0.05）;相比B组,C组和D组显著提高了瘤胃/复胃重（P＜0.05）;C组多浪羊瘤胃乳头的长度显著高于A组和E组（P＜0.05）,且多浪羊瘤胃乳头的长度随着饲粮中葡萄籽的添加量的增加呈现先上升后下降的趋势;B组、C组与A组和E组相比较,瘤胃乳头宽度明显增厚（P＜0.05）;C组、D组的肌层厚显著厚于A组（P＜0.05）;与A组相比,B、C、D、组角质层厚度均显著增高（P＜0.05）;E组固有层厚度显著低于其余四组（P＜0.05）;C组、D组十二指肠绒毛高度显著高于A、B、E组（P＜0.05）,A组十二指肠隐窝深度显著高于其他实验组（P＜0.05）,C组、D组V/C值显著高于A、B、E组（P＜0.05）;A组空肠隐窝深度显著高于C组（P＜0.05）,而V/C值C组显著高于A组;C组回肠隐窝深度显著低于D、E两组（P＜0.05）,与A、B组差异不显著（P＞0.05）;而V/C值C组显著高于其他四组（P＜0.05）。综上所述,饲粮中添加葡萄籽比例在8%和12%时增加瘤胃/复胃重,对瘤胃发育有促进作用;同时提高了瘤胃乳头高度、瘤胃宽度、瘤胃肌层厚、角质层厚。葡萄籽添加量在8%时,十二指肠、空肠绒毛高度/隐窝深度显著高于对照组,回肠隐窝最小,细胞生成率最大。试验三:饲粮中不同比例葡萄籽对多浪羊肠道细菌菌群的影响本试验旨在探索饲粮中不同比例葡萄籽对多浪羊肠道细菌菌群结构以及多样性的影响。试验设计和饲养管理同试验一。饲养试验结束后屠宰,采集十二指肠食糜,利用Pac Bio Sequel测序技术分析肠道细菌菌群的结构。结果显示:（1）样品测序覆盖率98.22%~98.82%,各组Alpha多样性差异不显著（P＞0.05）;25个样品测样出现了1038个OTU,统计分析试验组与对照组差异均不显著（P＞0.05）;（2）门水平优势菌门为厚壁菌门（Firmicutes）与放线菌门（Actinobacteria）,A组和B组拟杆菌门（Bacteroidetes）相对丰度与C组、D组、E组相比差异显著（P＜0.05）。（3）卡多威亚氏菌属（Aeriscardovia）为A、B、C、E四组第一优势菌群,占比最高,而D组第一优势菌群为毛螺菌科NK3A20属（LachnospiraceaeNK3A20group）。综上所述:多浪羊肠道优势菌门均为厚壁菌门与放线菌门,优势均属为（Aeriscardovia）。随着葡萄籽添加量的增加显著提高了毛螺菌属的丰度,抑制了拟杆菌门丰度,同时对放线菌门和瘤球菌属的丰度有促进作用;饲粮中添加不同比例葡萄籽不影响多浪羊肠道细菌多样性,影响部分菌群丰度。试验四:饲粮中不同比例葡萄籽对多浪羊肠道真菌菌群的影响本试验旨在探索饲粮中不同比例葡萄籽对多浪羊肠道真菌菌群结构以及多样性的影响。试验设计和饲养管理同试验一。饲养试验结束后屠宰,采集十二指肠食糜,利用Pac Bio Sequel测序技术分析肠道真菌菌菌群的结构。结果显示:（1）样品测序覆盖率98.9%~99.22%,各组Alpha多样性差异不显著（P＞0.05）;25个样品测样出现了896个OTU,统计分析试验组与对照组差异均不显著（P＞0.05）;（2）、五组优势菌门均为子囊菌门（Ascomycota）;E组担子菌门（Basidiomycota）显著高于A、B两组,差异显著（P＜0.05）,C组壶菌门（Chytridiomycota）显著高于B组,（P＜0.05）。（3）在属水平上梨囊鞭菌属（Piromyces）为E组第一优势菌群占比最高,链格孢属（Alternaria）为C组第一优势菌属,新美鞭菌属（Neocallimastix）为A、B组第一优势菌属,而D组第一优势菌属为枝孢属（Cladosporium）。属水平总体差异不显著（P＞0.05）。结论:多浪羊肠道优势菌门均为子囊菌门（Ascomycota）;随着葡萄籽添加量的增加提高了担子菌门和梨囊鞭菌属的丰度,抑制了新美鞭菌属丰度,同时对曲霉属丰度有促进作用;饲粮中添加不同比例葡萄籽不影响多浪羊肠道真菌多样性,均提高了优势均属总体丰度。结论综上所述,葡萄籽添加量在8%~12%时促进营养物质吸收,提高表观消化率,同时促进胃肠道发育。随着葡萄籽添加量的升高对细菌以及真菌菌群多样性影响不大,提高部分菌群丰富度,其中对参与部分免疫作用的细菌有促进作用,对真菌菌群丰度总体有促进作用。