第一部分HLA-G在子宫腺肌病中的表达及意义目的:证明免疫耐受相关分子HLA-G在子宫腺肌病患者的在位内膜和异位灶中的表达情况;比较其在子宫腺肌病患者和正常子宫内膜人群中的差异表达,以期说明HLA-G分子在子宫腺肌病患者免疫耐受状态建立中的作用和在本病发生发展中的意义。方法:34例经病理证实为子宫腺肌病标本为观测组,同时收集30例正常子宫内膜人群的手术切除标本作为对照,采用免疫组织化学染色技术和原位杂交技术检测正常子宫内膜和腺肌病组的在位内膜和异位灶中的HLA-G蛋白和mRNA差异表达情况。采用Hscore评分系统对染色结果进行定量分析,应用SPSS13.0软件进行统计学分析。结果:1.HLA-G蛋白在正常增殖期和分泌期内膜中几乎均不表达,不论是腺上皮细胞还是间质细胞。2.在34例分泌期和增殖期腺肌病在位内膜和异位灶中均发现HLA-G蛋白的表达。腺肌病在位内膜和异位灶中的上皮细胞的染色强度及阳性率均高于间质细胞。上皮细胞和间质细胞的染色均主要位于细胞浆和细胞膜,未见胞核有表达。在腺肌病在位内膜中,增殖期和分泌期腺上皮均存在HLA-G蛋白的表达,增殖期与分泌期内膜Hscore相比无显著差异(P＞0.05),未发现周期性变化。增殖期和分泌期内膜的间质细胞间Hscore相比也无显著差异(P＞0.05)。腺肌病的异位内膜腺上皮HLA-G蛋白表达Hscore显著高于在位内膜腺上皮(P＜0.05);而异位内膜间质细胞HLA-G蛋白表达则低于在位内膜间质细胞,差异有显著性(P＜0.05)。3.腺上皮中的HLA-G蛋白表达在子宫腺肌病患者的异位内膜和在位内膜之间存在正相关,r=0.89(P＜0.0001);间质细胞中的HLA-G蛋白表达在子宫腺肌病患者的异位内膜和在位内膜之间也存在正相关,r=0.78(P＜0.0001)。4.HLA-G mRNA在正常内膜、在位内膜与异位内膜组织中的表达阳性率分别为1/30、28/34、31/34。其中,阳性信号主要位于腺上皮细胞胞浆,间质细胞阳性细胞率较低。结论:1.子宫腺肌病患者在位内膜和异位灶中均存在HLA-GmRNA和HLA-G蛋白的表达,而正常子宫内膜中则几乎未发现该分子的存在,说明HLA-G可能通过建立局部的免疫耐受和免疫抑制的微环境而参与子宫腺肌病的发生发展。2.子宫腺肌病患者在位内膜和异位灶中的HLA-G表达存在正相关性,提示在位内膜的生物学特质在子宫腺肌病的发病中起重要作用。第二部分IL-10在子宫腺肌病中的表达及意义目的:证明免疫耐受相关分子IL-10在子宫腺肌病患者的在位内膜和异位灶中的表达情况;比较其在子宫腺肌病患者和正常子宫内膜人群中的差异表达,以期说明IL-10分子在子宫腺肌病患者免疫耐受状态建立中的作用和在本病发生发展中的意义。方法:34例经病理证实为子宫腺肌病标本为观测组,同时收集30例正常子宫内膜人群的手术切除标本作为对照,采用免疫组织化学染色技术和原位杂交技术检测正常子宫内膜和腺肌病组的在位内膜和异位灶中的IL-10蛋白和mRNA差异表达情况。采用Hscore评分系统对染色结果进行定量分析,应用SPSS13.0软件进行统计学分析。结果:1.在30例(分泌期和增殖期)正常子宫内膜中均发现IL-10的表达。不论是增殖期内膜还是分泌期内膜,上皮细胞的染色强度均高于间质细胞。二者的染色均主要位于细胞浆中。分泌期上皮细胞的Hscore显著高于增殖期上皮细胞(P＜0.01),而间质细胞的染色则未发现周期性变化(P=0.62)。2.在34例分泌期和增殖期在位内膜和异位灶中均发现IL-10的表达。与正常内膜相似,腺肌病在位内膜和异位灶中的上皮细胞的染色强度高于间质细胞。上皮细胞和间质细胞的染色均主要位于细胞浆中。腺肌病的在位内膜和异位灶腺上皮Hscore均显著高于正常内膜(均P＜0.01)。然而,在位内膜和腺肌病灶之间相比,腺上皮Hscore差异不显著(P=0.08)。此外,腺肌病灶、在位内膜和正常内膜之间两两比较,间质细胞Hscore无显著差异(均P＞0.05)。腺肌病在位内膜中,IL-10分泌期腺上皮染色Hscore明显高于增殖期(P＜0.01),呈现周期性变化。然而在间质细胞中未发现这种周期性变化(P=0.22)。3.腺上皮中的IL-10蛋白表达在子宫腺肌病患者的异位内膜和在位内膜之间存在正相关,r=0.55(P＜0.001);间质细胞中的IL-10蛋白表达在子宫腺肌病患者的异位内膜和在位内膜之间未发现相关性,r=0.02(P＞0.05)。4.IL-10 mRNA在正常内膜、在位内膜与异位内膜组织中的表达阳性率分别为28/30、33/34、34/34。其中,阳性信号主要位于腺上皮细胞胞浆,间质细胞阳性细胞率较低。结论:1.子宫腺肌病患者在位内膜和异位灶中均存在较高水平的IL-10的表达,而正常子宫内膜中该分子表达水平较低,说明IL-10可能通过建立局部的免疫耐受和免疫抑制的微环境而参与了子宫腺肌病的发生发展。2.子宫腺肌病患者在位内膜和异位灶中的IL-10表达存在正相关性,提示在位内膜的生物学特质子宫腺肌病的发病中起重要作用。第三部分HLA-G和IL-10在卵巢子宫内膜异位囊肿液中的表达及相关性目的:证明免疫耐受相关分子HLA-G和IL-10在卵巢子宫内膜异位囊肿液中的表达情况;以期说明HLA-G和IL-10在子宫内膜异位症患者免疫耐受状态建立中的作用和在本病发生发展中的意义并探讨这两种分子之间的相关性。方法:收集15例子宫内膜异位症患者的卵巢子宫内膜异位囊肿液和腹腔液,收集15例子宫肌瘤患者的腹腔液,采用Western blot技术检测其中的HLA-G和IL-10分子。应用SPSS13.0软件进行统计学分析,采用t检验对两种分子进行相关性分析。结果:1.在15例卵巢子宫内膜异位囊肿患者的腹腔液中,2例HLA-G蛋白阳性,其余13例均未发现该分子;在15例子宫肌瘤患者的腹腔液中均未发现HLA-G蛋白的表达;而在卵巢子宫内膜异位囊肿液中则发现该分子高表达。2.在15例卵巢子宫内膜异位囊肿患者的腹腔液中均发现IL-10蛋白的表达.在15例子宫肌瘤患者的腹腔液中4例发现IL-10蛋白的表达,其余11例均为阴性;而在卵巢子宫内膜异位囊肿液中则发现该分子高表达。3.IL-10和HLA-G在卵巢子宫内膜异位囊肿液中的表达存在相关性,(r=0.78,P＜0.0001)。4.IL-10和HLA-G在子宫腺肌病患者异位内膜上皮细胞中的表达存在相关性(r=0.66,P＜0.001);在位内膜皮细胞中的表达也存在相关性(r=0.60,P＜0.001)。结论:1.子宫内膜异位囊肿液中存在较高水平的HLA-G和IL-10的表达,说明这两种分子可能通过建立局部的免疫耐受和免疫抑制的微环境而参与了子宫内膜异位症的发生发展。2.IL-10和HLA-G在子宫内膜异位症的表达存在相关性。3.IL-10和HLA-G在子宫腺肌病患者异位内膜上皮细胞中的表达存在相关性;在位内膜上皮细胞中的表达也存在相关性。