单克隆抗体3H11对应抗原的分子克隆

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单克隆抗体(McAb)3H11在免疫组化中可与多种肿瘤组织特异性反应.放射性核素标记的McAb3H11已经成功试用于肿瘤原发灶和转移灶的临床显像.因此,克隆McAb3H11抗原对认识肿瘤发生及相关的临床应用研究均具重要意义.用λ-ZAPⅡ载体构建有胃癌胞系MGC803cDNA表达文库经McAb3H11免疫筛选,获得阳性cDNA片段,该片段的重组表达产物经WesternBlot证实能被McAb3H11特异识别.在此基础上用cDNA末端快速克隆技术(RACE)等方法获得该抗原的全长cDNA2156bp.测序结果表明,该cDNA的开放阅读框架为1767bp,编码589个氨基酸,在GenBank中无高度同源序列.Northernblot和RT-PCR实验初步发现,该抗原主要分布于恶性肿瘤细胞及胎盘组织.在利用原核表达的该抗原免疫家兔和小鼠制备抗体的过程中,发现该抗原免疫原性很低,我们推测该抗原可能是哺乳动物胚胎生长的表达调控蛋白,在肿瘤中恢复表达,与细胞快速增殖和低分化相关.
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