鸡传染性支气管炎病毒河北株WQ2的全基因组测序及疫苗的免疫效力评价

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鸡传染性支气管炎(Avian Infectious Bronchitis,IB),是由鸡传染性支气管炎病毒(Avian Infectious Bronchitis virus,IBV)所引发的一种急性、热性、高接触性传染病。产蛋鸡感染会导致产蛋量下降,蛋品质的降低,甚至对输卵管造成永久性的损伤;IB现在尚无有效的治疗方法。对于IB的防控主要以疫苗免疫为主,但由于IBV血清型复杂,变异程度高,变异速度快,不同血清型之间几乎不具备交叉保护作用,使IB的防控工作存在较大的困难。实验室前期研究发现,河北地区IBV流行毒株为QX,为进一步评估本地区IBV的致病性,了解其分子生物学特征及遗传进化规律,并评估弱毒疫苗和灭活疫苗对本地区流行株的保护效果,针对河北地区IBV流行株WQ2做了如下研究:1.河北地区IBV流行株WQ2全基因组测序及致病性研究为掌握河北地区IBV流行株WQ2的遗传进化情况,本研究对WQ2株进行全基因组测序,结果显示IBV WQ2基因组全长27241 bp,共编码14268个氨基酸;与32株参考毒株及疫苗株全基因组序列进行相似性比对发现,分离株WQ2与LX4型毒株的相似性在87.8%~90.6%之间,同属一群。分析发现IBV WQ2株存在2个重组事件,重组断点位于3418 bp~3507 bp和5863 bp~5903 bp,表明WQ2株可能是LX4型不同毒株的基因重组变异而来。为进一步了解WQ2株的致病性,对雏鸡进行攻毒试验,结果显示WQ2株攻毒5 d后雏鸡出现明显的呼吸道症状,经RT-PCR检测病死鸡器官IBV均为阳性,发病率为100%,表明IBV WQ2株对雏鸡有较强的致病力。2.商品弱毒疫苗对IBV WQ2的免疫保护效果为评价商品弱毒疫苗对河北地区IBV流行株WQ2的免疫保护效果,本研究选择3种市售弱毒疫苗QX、H120和4/91免疫雏鸡,攻毒试验结果显示,4/91组免疫后能刺激鸡体产生较高的特异性抗体水平,在首免后28 d达到高峰,并与H120组与QX组的抗体水平存在显著差异(p<0.05);攻毒后各免疫组的免疫保护结果显示,疫苗4/91的免疫保护力较好,保护率为85%,免疫后刺激机体产生的抗体S/P值达0.5799;疫苗H120与疫苗QX的免疫保护力分别为60%和70%。3.以WQ2为疫苗株研制灭活疫苗对WQ2的免疫保护效果为研发针对本地区流行株的灭活疫苗,以QX型毒株WQ2作为疫苗株研制灭活疫苗,经测定安全无毒性,稳定性好;对鸡只进行免疫攻毒试验结果显示,二免后14 d,灭活疫苗的抗体水平达到峰值,其中,以4×灭活疫苗(高剂量)的抗体水平较高,S/P值达0.566,与M41免疫组的抗体水平相比显著不差异(p>0.05),表明IBV灭活疫苗免疫后可产生较高的抗体水平,且对同株产生很好的保护效果。
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