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T-box基因家族为脊椎动物心脏的正常发育所必须，对早期心脏谱系的确定有重要作用，并参与腔室、血管的分化及心脏传导系统的形成。转录因子Tbx18是T-box家族的新成员，是新的祖细胞标记因子之一，具有诱导多向分化潜能，研究认为其主要负责心管后极的延伸，它标记的心脏祖细胞被称为第三心脏发育区心脏祖细胞，对心脏的发育起重要作用。因此，明确转录因子Tbx18胚胎在心脏发育过程中的时空定位、定量表达及其对心脏发育的作用，对进一步的功能研究具有重要意义。目的：检测Tbx18在小鼠心脏发育过程中的时空定位定量表达模式；揭示Tbx18在小鼠胚胎发育中的作用。方法：利用地高辛标记试剂盒标记并合成Tbx18RNA探针，用原位杂交技术检测小鼠整体胚胎及整体心脏Tbx18mRNA的表达，并对杂交后的结果进行切片分析。用荧光定量PCR检测小鼠胚胎期心脏mRNA的定量表达。用X-gal染色检测Tbx18-Cre/Rosa26R/LacZ基因谱系示踪模型小鼠的报告基因LacZ蛋白的表达。用体视镜观察Tbx18Cre/Cre基因敲除模型小鼠胚胎的发育状况并用HE染色来观察该模型胚胎心脏发育受到的影响。结果：1.原位杂交结果显示：小鼠胚胎转录因子Tbx18mRNA在E9.5d主要在小鼠胚胎的前体心外膜表达；在E10.5d在小鼠胚胎的前体心外膜及心外膜均有表达；在E11.5d前体心外膜无表达，而在心外膜的表达增多；12.5d在小鼠胚胎期的心外膜明显表达，并逐渐定位于心内膜下的心肌细胞；大于E12.5d向心肌细胞分化表达的量逐渐增多。在E12.5d至E16.5天mRNA的表达量逐渐增加，之后表达量逐渐下降，至出生时明显减少。2.荧光定量PCR结果显示：转录因子Tbx18在E12.5d至E16.5d的胚胎表达量逐渐增多，大于E16.5d的胚胎表达量逐渐减少，出生时表达明显减少。3.X-gal染色显示： Tbx18-Cre/Rosa26R/LacZ双杂基因谱系示踪模型在早期小鼠胚胎期心脏LacZ蛋白在在E9.5d主要位于胚胎心脏前体心外膜；E10.5d以后逐渐分化形成心外膜；E11.5主要在心外膜表达；而在大于E12.5d逐渐在心室、心房及窦角区等心脏组织中表达。4.用体视镜观察到Tbx18Cre/Cre基因敲出小鼠胚胎整体长度变短，全身水肿。HE染色显示Tbx18Cre/Cre基因敲出小鼠心脏发育异常，表现为窦角区心肌化延迟和窦房结头部缺失等发育异常。结论：转录因子Tbx18是小鼠胚胎期心脏前体心外膜祖细胞群的标志之一，其表达具有时空特异性，表现为由前体心外膜向心外膜逐渐迁移，并逐渐向心肌细胞分化，其在心脏的表达有逐渐增加又逐渐降低的过程；Tbx18-Cre/Rosa26R/LacZ基因谱系示踪模型小鼠揭示出Tbx18在胚胎早期由前体心外膜向心外膜迁移，并在胚胎中晚期参与分化形成心房、心室及窦角区的心肌组织，说明其对心脏的发育起重要作用； Tbx18Cre/Cre敲出模型小鼠在胚胎整体及胚胎心脏的发育都表现出现明显的异常，尤其是窦角区心肌化的延迟，说明Tbx18为心脏发育不可缺少的转录因子。本阐明了Tbx18在小鼠心脏发育过程中的时空表达及作用，能为研究其在心脏发育中的功能和机制提供依据。