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内毒素或脂多糖（LPS）作为革兰氏阴性菌胞壁的一种特有成分，是最常见，最主要的致病因素之一，当其作用于机体时，常引发多种疾病及并发症的发生，主要与血管功能紊乱有关。诸如当其滴鼻注射于小鼠时，就会导致小鼠急性肺损伤（Acute Lung Injury，ALI）的发生，诱导机体产生一系列病理变化，炎性细胞因子的释放，肺组织结构破坏，肺泡内出现大量红细胞和炎性细胞浸润等。其中，肺微血管内皮细胞（Pulmonary Microvascular Endothelial Cells，PMVEC）是在发病过程中最先受损引起凋亡的细胞。银杏内酯A （GinkgolideA）作为银杏叶提取物的主要单体成分之一，主要用于血小板活化因子的拮抗剂，此外，还有抗自由基、抗细胞凋亡、保护血管内皮等作用。然而，关于GinkgolideA是否可以通过抑制血管内皮细胞凋亡来达到保护ALI的目的还未报道，因此，本试验以银杏内酯A（Ginkgolide A）为研究对象，从体内和体外两方面考察Ginkgolide A抗血管内皮细胞凋亡的生物学效应。首先，通过建立小鼠急性肺损伤模型，收集支气管灌洗液和右肺等样品。利用酶链免疫吸附实验（ELISA）检测支气管灌洗液的细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β的表达水平，然后将固定好的右肺，运用苏木精—伊红染色（HE Stain）、原位末端标记法（TUNEL）进行肺组织病理学观察和血管内皮细胞凋亡情况的检测。结果可见，GikgolideA能显著抑制LPS诱导的炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β（P<0.01或p<0.05）的产生，改善肺组织病理变化，显著降低血管内皮细胞的凋亡（P<0.01或p<0.05）。表明Ginkgolide A对LPS诱导的ALI有一定的保护作用。体外试验研究中，通过DNA LADDER、荧光显微镜和激光共聚焦检测发现不同浓度的LPS处理细胞48h后，出现了明显的凋亡条带，24h后有明显的凋亡形态学变化，细胞变圆皱缩，胞膜出现空泡，核染色质固缩，集聚于核膜边缘呈现新月形以及凋亡小体的形成，其凋亡程度具有浓度依赖性，确定LPS能够诱导PMVEC发生凋亡；MTT法、流式细胞术（FCM）检测技术进一步研究，结果表明GinkgolideA在10μg/mL作用于PMVEC时，不会对细胞产生显著的细胞毒反应。在该浓度下对细胞进行处理，与LPS组比较Ginkgolide A能够显著提高G2/M期细胞百分数（p<0.05），确定了GinkgolideA促细胞增殖的作用；进一步通过反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和免疫印迹法（Western Blotting）检测发现，GinkgolideA显著上调了Bcl-2mRNA、c-Myc mRNA水平以及Bcl-2蛋白、NF-κB蛋白、IκB蛋白表达水平，下调了P-NFκB蛋白、P-IκB蛋白表达水平（P<0.01或p<0.05），但对c-Fos mRNA和c-Jun mRNA的表达没影响。结果表明GinkgolideA具有一定的抗凋亡作用，其作用机制与调节NF-κB信号通路有关。综上所述，本试验证明，Gikgolide A能显著抑制LPS诱导的炎性因子的释放，并能改善肺组织病理变化和肺脏微血管内皮细胞的凋亡，且其作用机制与NF-κB介导的凋亡信号通路有关。这将为我们在后续研发抗凋亡新药以及在临床治疗疾病中的广泛应用提供了很好的实验数据和理论基础。