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目的:吗啡等阿片类镇痛药物能有效地治疗疼痛,但长期使用会出现成瘾、耐受、便秘等阿片副作用。内吗啡肽-2（EM-2）是μ-阿片受体的内源性配体,EM-2在中枢具有与吗啡相当的镇痛作用且副作用较小,但耐受性、成瘾性、便秘和不易透过血-脑屏障等缺点限制其在临床上的应用。内源性脑肠肽ghrelin具有镇痛活性的同时还具有促进胃肠转运和能透过血-脑屏障等优点,有研究表明ghrelin活性片段为ghrelin受体激动剂,并且本课题组前期研究表明ghrelin活性片段具有镇痛活性并能通过血-脑屏障。近年来基于EM-2和其他神经肽的杂合肽表现出良好的镇痛作用,其阿片样副作用得到部分降低,但仍无法完全克服。基于杂合肽的研究思路,本课题通过化学连接的方法,构建并合成μ-阿片/ghrelin受体的杂合肽G（1-5）-EM-2,EM-2-G（1-5）,G（1-9）-EM-2和EM-2-G（1-9）,探究其镇痛活性及其阿片样副作用,为合成新型的镇痛分子提供一定的实验思路和理论支持。方法:本论文中所选动物均为昆明雄性18-22 g小鼠,随机进行分组。通过小鼠温浴甩尾实验,检测经侧脑室和尾静脉注射杂合肽的镇痛活性,探究其作用途径及血-脑屏障透过性;通过耐受实验,对杂合肽的耐受性进行分析;通过胃排空实验、小肠推进实验和结肠排珠实验,探究杂合肽对胃肠转运以及便秘的影响。结果:1、经侧脑室注射,杂合肽均能产生良好的镇痛作用,G（1-5）-EM-2,EM-2-G（1-5）,G（1-9）-EM-2和EM-2-G（1-9）的ED50值分别为31.61（26.62-37.54）nmol/kg,32.71（28.88-37.04）nmol/kg,19.56（15.45-24.77）nmol/kg和37.06（30.05-45.04）nmol/kg。2、经侧脑室共注射杂合肽与各种阿片受体拮抗剂和ghrelin受体拮抗剂[D-Lys3]-GHRP-6（DLS）,结果显示杂合肽的中枢镇痛途径通过不同的阿片受体和ghrelin受体发挥作用。3、经尾静脉注射,结果显示G（1-5）-EM-2具有良好的镇痛活性,G（1-5）-EM-2与纳洛酮和甲碘化纳洛酮的联合使用,结果显示G（1-5）-EM-2能透过血-脑屏障到达中枢发挥镇痛作用。4、经侧脑室注射,测定杂合肽的耐受性,结果显示,与EM-2相比,G（1-5）-EM-2,EM-2-G（1-5）和EM-2-G（1-9）未产生急性耐受,耐受率分别为1.06,1.39,1.08。G（1-9）-EM-2的急性耐受相对于EM-2明显降低,耐受率为2.31;杂合肽的慢性耐受与EM-2相当;杂合肽与EM-2之间只有部分较低的慢性交叉耐受。5、经侧脑室注射,测定其对小鼠的胃排空和小肠推进作用,结果显示,G（1-5）-EM-2和EM-2-G（1-5）相对于EM-2更利于胃排空;G（1-9）-EM-2相对于EM-2更利于小鼠的小肠推进。6、经侧脑室注射,测定其对小鼠结肠排珠时间的影响,结果显示,EM-2-G（1-5）和EM-2-G（1-9）相对于EM-2更利于结肠排珠时间的缩短。结论:侧脑室注射基于μ-阿片/ghrelin受体的杂合肽能产生良好镇痛作用,其镇痛作用主要通过阿片受体和ghrelin受体起作用;尾静脉注射G（1-5）-EM-2能产生良好的镇痛作用并能透过血-脑屏障;杂合肽相较于EM-2,极大地改善了镇痛耐受;部分杂合肽相较于EM-2,极大地改善了其对胃肠转运的抑制作用。综合而言,杂合肽G（1-5）-EM-2通过中枢和外周给药都能产生较好的镇痛作用,并能透过血脑屏障以及能较好的改善阿片样副作用,有望发展为一种新型镇痛药物。