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金蝉花(Cordyceps cicadae)为麦角菌科真菌大蝉草及其寄主山蝉若虫形成的干燥复合体,与冬虫夏草的无性型同属,在民间是一种药食两用真菌。其性寒味甘,具疏散风热、定惊镇痉等功效。蝉花主要生长在四川、江浙地区、福建、安徽及云南等省份。近年来,冬虫夏草的大规模采收导致资源枯竭,金蝉花与冬虫夏草成分相似,功效相近,有望开发成冬虫夏草的替代品。本论文系统分析了金蝉花中营养成分,建立了高效液相色谱法同时测定金蝉花中6个核苷类成分的方法,并对其主要有效成分(甘露醇、麦角甾醇和核苷类成分)进行含量测定。采用体外抗氧化活性实验对不同浓度乙醇醇沉金蝉花多糖进行筛选,得到最佳抗氧化活性多糖组分,研究了其对果蝇寿命及抗氧化活性的影响,并对其作用机制进行了初步探讨,为金蝉花进一步开发利用提供理论依据。主要研究内容如下:1.金蝉花营养成分研究。按照食品安全国家标准,对12个不同产地的金蝉花样品中主要营养成分、粗多糖以及金属成分进行含量测定。结果显示,纤维素、粗蛋白、粗脂肪、水分、灰分及碳水化合物等含量分别为36.98%~42.84%、33.9%~37.62%、4.46%~8.87%、4.37%~6.06%、5.77%~9.59%和3.08%~8.40%。金蝉花粗多糖含量为2.27%~3.58%。金蝉花中金属成分Cd、Pb、Hg、As的含量均低于国标中食用菌重金属的限量标准(1.0 mg/kg、0.2 mg/kg、0.1 mg/kg和0.5mg/kg)。2.金蝉花核苷类成分的LC-MS分析及含量测定。采用高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)-质谱(Mass Spectrometry,MS)联用法对金蝉花水超声提取物中核苷类成分进行定性分析,初步鉴定出7种主要核苷类成分,并对峰面积较大的6个核苷类成分(腺嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷、腺苷和N6-(2-羟乙基)腺苷)建立了HPLC同时测定的方法,测定了12个不同产地金蝉花核苷类成分的含量。结果显示,该方法分离度及峰形良好,精密度、准确度、稳定性和重复性等考察良好,可进行核苷类成分的检测分析;不同产地金蝉花的6个核苷类成分分别为17.6~77.34μg/g、1077.56~1538.21μg/g、50.24~481.39μg/g、293.84~705.44μg/g、408.2~784.27μg/g和534.24~921.91μg/g。3.金蝉花麦角甾醇及甘露醇含量测定。根据中国药典规定,分别采用HPLC法和紫外分光光度计法,测定12个不同产地的金蝉花菌核、子实体和整株中麦角甾醇和甘露醇的含量。结果显示,整株金蝉花麦角甾醇含量为281.88~683.1μg/g,子实体中麦角甾醇含量明显高于菌核,分别为540.57~1800.39μg/g和129.83~229.55μg/g。金蝉花中甘露醇含量为82.12~136.24 mg/g,菌核中甘露醇含量略高于子实体,其均值分别为112.53~154.29 mg/g和68.71~105.62 mg/g。4.金蝉花多糖体外抗氧化研究。通过不同浓度乙醇醇沉金蝉花水提物,得到6个金蝉花多糖组分CP 30~CP 80,并测定不同浓度醇沉金蝉花多糖的DPPH自由基和·OH自由基清除能力、总还原能力和总抗氧化能力。结果显示,金蝉花多糖组分抗氧化活性为:CP70>CP60>CP80>CP50>CP30>CP40,表明金蝉花多糖组分CP70具有最佳抗氧化活性。5.金蝉花多糖CP70体内抗氧化研究。利用双氧水(H2O2)应激果蝇模型和正常生理衰老果蝇模型,研究高、中、低剂量(10 mg/mL、5 mg/mL和1 mg/mL)金蝉花多糖组分CP70对果蝇寿命的影响,并测定了中剂量组(5 mg/mL)金蝉花多糖组分CP70对果蝇体内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)含量以及过氧化氢酶(CTA)活力的影响,同时利用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)测定4种衰老相关基因(CAT、过氧化物歧化酶SOD1、MTH和SIRT2)mRNA表达水平。结果显示,金蝉花多糖CP70组分对两种模型下果蝇的平均寿命和最高寿命均有延长,且中等剂量组(5 mg/mL)效果最为显著;5 mg/mL金蝉花多糖组分CP70显著升高了CAT酶(P<0.01)和GSH-Px酶活力(P<0.001),降低了MDA的含量(P<0.001);另外,金蝉花多糖组分CP70显著上调了果蝇体内CAT、SOD1和MTH mRNA水平的表达(P<0.05),而对SIRT2mRNA水平的表达无显著差异,推测金蝉花多糖组分CP70能显著延长果蝇寿命可能与上调抗氧化相关基因CAT、SOD1和MTH的表达水平有关。