人iPS细胞对人肺腺癌A549细胞上皮间充质转化过程的研究

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诱导性多能干细胞(induced pluripotent stemcells,iPS)具有多向分化潜能、较强的自我增殖等特点、并且没有免疫排斥和伦理道德等多方面的限制。干细胞疗法是应用于实验或临床医学等许多领域的重要治疗方法,但是干细胞和肿瘤细胞之间的相互关系仍然没有定论。有部分研究表明,干细胞可以促进肿瘤生长和转移[1-4]。但是,也有一些研究表明了相反的结果,干细胞抑制了肿瘤生长[5-8]。因此,本论文重点针对人iPS细胞在人肺腺癌A549细胞发生上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用进行研究。研究目的:人iPS细胞对人肺腺癌A549细胞上皮-间充质转化过程的影响。研究方法:人iPS细胞和人肺腺癌A549细胞培养条件的优化,使两者增殖生长状态良好。人iPS细胞和人肺腺癌A549细胞通过Transwell小室间接接触共培养,人iPS细胞所分泌的细胞因子就可以通过滤膜渗透到人非小细胞肺腺癌A549细胞的微环境中。研究与人iPS细胞间接接触共培养的条件下,人非小细胞肺腺癌A549细胞的细胞形态、侵袭能力、凋亡、增殖、EMT相关基因波形蛋白、E-钙黏素、N-钙黏素、Snail、Slug、Twist、MMP-2、MMP-9mRNA 的表达量。研究结果和结论:(1)与空白对照组和阴性对照组对比,实验组人iPS细胞与人肺腺癌A549细胞共培养后,人肺腺癌A549细胞形态发生了间质样变化,侵袭能力明显增强,凋亡率降低,增殖能力提高。实验组MMP-9mRNA表达量比阴性对照组提高了6.06倍,比空白对照组提高了 5.49倍,MMP-9mRNA表达量明显提高。波形蛋白mRNA表达量提高,E-钙黏素mRNA表达量稍有降低,N-钙黏素、Snail、Slug、Twist、MMP-2mRNA表达量的变化不明显。(2)结果表明人iPS细胞与人肺腺癌A549细胞共培养会促进人肺腺癌A549细胞发生上皮细胞-间充质转化过程,增强人肺腺癌A549细胞运动侵袭能力。
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