目的:膀胱癌是我国泌尿系统最常见的恶性肿瘤,Wnt/β-catenin信号通路的异常活化在膀胱癌的发生发展中起重要作用。研究表明,Reic/Dkk3是Wnt信号通路的抑制剂,它能够通过调控Wnt/β-catenin信号传导抑制膀胱癌的生长,但REIC/Dkk-3缺乏针对肿瘤细胞的靶向迁移能力和趋向性。人脐带间充质干细胞(Human umbilical cord mesenchymal stem cells HUC-MSCs)不仅是基因的理想载体,且具有良好的肿瘤组织定向趋化能力。本课题拟构建抑癌基因REIC/Dkk-3修饰的HUC-MSCs,通过体外实验验证其对膀胱癌细胞系生物学行为的影响并探讨其作用机制。方法:(1).采用组织块法分离HUC-MSCs并鉴定;(2).过表达REIC/Dkk-3的慢病毒载体构建,转染并构建REIC/Dkk-3修饰的HUC-MSCs,探讨转染前后HUC-MSCs稳定性改变;(3).将REIC/Dkk-3修饰的HUC-MSCs与膀胱癌细胞系T24进行共培养,探讨其对T 2 4细胞增殖能力、迁移能力及侵袭能力的影响;(4)探讨β-catenin对膀胱癌转移的作用机制。结果:(1).分离得到的HUC-MSCs呈梭形,贴壁螺旋生长,具备成脂及成骨分化能力,表面标志物表达水平符合鉴定标准;(2).构建过表达REIC/Dkk-3的慢病毒载体,转染慢病毒载体后的HUC-MSCs仍具备间充质干细胞特性,且其REIC/Dkk-3分泌量明显增加;(3).REIC/Dkk-3修饰后的HUC-MSCs上清液在体外抑制膀胱癌T24细胞增殖及侵袭,该作用与β-catenin的表达及定位有关;(4)β-catenin调控基质金属蛋白酶-9参与膀胱癌侵袭及转移。结论:通过慢病毒转染成功构建REIC/Dkk-3修饰的HUC-MSC,并能够高效分泌REIC/Dkk-3,REIC/Dkk-3修饰的HUC-MSC能够改变T24细胞中β-catenin的表达定位,β-catenin胞内定位的改变调控Wnt信号通路及MMP9活性,抑制膀胱癌细胞的增殖及侵袭能力。