邻苯二胺为基础的比例荧光体系构建及在分析检测中的应用

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在经济水平飞速发展的今天,人民生活变得越来越便捷的同时,也面临着更多的环境污染与健康问题,有机污染物、重金属离子等环境污染物或维生素、抗生素等事关人体健康成分的检测都是当前研究的焦点。因此,开发高效便捷的分析方法对这些影响环境或人体健康的成分进行检测就变得十分重要。在这样的背景下,分析技术水平得以高速发展,各种分析方法层出不穷且各具独特的优势,然而大多数分析方法都因成本昂贵、操作复杂等不足而在实际应用中受到限制。在诸多分析方法中,荧光分析法由于其成本低廉、操作简便、所得结果快速而准确等特点脱颖而出,成为诸多分析方法中的佼佼者之一,近年来被广泛应用于医学、环境监测、食品药品分析等诸多领域。但目前大多数荧光分析法都是基于单一荧光发射信号建立的,很容易受到测试环境波动的影响。相比之下,比例荧光分析体系可以通过计算两个荧光峰信号的强度比来提供更准确的测量结果,能够更好的抵抗外部环境干扰,使所得结果更稳定、准确度更高。邻苯二胺是一种结构简单、性质灵活多样且毒性较低的有机物,因此经常被研究者们用作合成荧光材料的原材料或作为构建荧光分析体系的底物。在本论文中,针对环境污染和健康问题的分析检测工作,以邻苯二胺作为底物,设计了不同的比例荧光分析体系实现了对2,4,6-三硝基苯酚(TNP)、抗坏血酸(AA、维生素C)的分析检测,并对其传感机理进行了深入研究,进一步将所开发的分析体系应用在实际样品检测中,具体工作如下:(1)设计合成了双发射荧光的碳点(CDs),并基于此构建比例荧光传感体系,实现了TNP的快速准确检测。在本部分工作中,以邻苯二胺和乙醇胺为原料,通过溶剂热反应制备了一种双发射碳点(DE-CDs)。在紫外光的激发下,所制备的DE-CDs不仅显示出两个可区分的荧光发射峰(430 nm,550 nm),而且表现出良好的水溶性和比例荧光稳定性。所合成的DE-CDs进一步用于TNP的检测,具有响应速度快且选择性好的优势。在最佳分析条件下,线性范围为0.2-50μM,检测限可达50 n M。该方法成功应用于河水等实际水样中的TNP检测,回收率为86.8-116.3%。此外,基于DE-CDs良好的生物相容性和荧光性能,实现了细胞内TNP的可视化成像分析。(2)基于氧化铜纳米颗粒(CuO NPs)和邻苯二胺构建了高选择性的抗坏血酸(维生素C,AA)比例荧光分析体系。在本部分工作中,结合CuO NPs固有的氧化酶模拟活性和抗坏血酸氧化酶模拟活性以及邻苯二胺氧化生成发光二聚体的特性,构建了一种比例荧光分析体系实现了人类血清和水果中AA的准确检测。在该体系中,利用CuO NPs的两种模拟酶活性,唯一底物邻苯二胺可以被催化氧化成发黄色荧光的2,3-二氨基吩嗪,同时抗坏血酸被催化氧化为脱氢抗坏血酸又可与底物邻苯二胺反应缩合形成蓝色荧光分子。抗坏血酸的存在可以显著阻碍邻苯二胺的氧化过程,随着抗坏血酸浓度升高,黄色荧光信号逐渐降低而蓝色荧光信号逐渐增加。该方法对AA具有较好的响应灵敏度,线性范围为1-150μM,检测限为0.16μM。该方法成功用于人类血清样品和水果样品中AA含量的分析,加标回收率在84.83%-113.1%之间。为了进一步提高该方法的简便性和实用性,成功设计开发了基于色度变化的扫描比色定量分析模型。
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