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背景和目的胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,因其发现较晚并具有较强的局部侵袭和远距离转移的趋向而居于癌症致死原因之前列。因此,揭示胃癌发病的分子机制具有重要的理论价值和临床意义。研究发现,胃癌发病与某些肿瘤相关基因异常表达密切相关,其中包括细胞黏附分子E-cadherin。E-cadherin是一种介导细胞间同嗜性黏附的跨膜糖蛋白,广泛分布于上皮细胞膜。E-cadherin的表达减少或丢失被认为是细胞去分化的典型特征之一并提示癌症患者预后不佳。不过,引起E-cadherin蛋白含量下降的原因迄今尚未完全阐明。目前,国内外对E-cadherin的绝大多数报导局限在蛋白水平,很少涉及该基因的转录状况即mRNA水平/含量;对E-cadherin转录和翻译之间的一致性尚无详细报导。因此,E-cadherin mRNA与其蛋白下调之间的关系成为本课题力图阐明的问题。本实验首先分析了E-cadherin mRNA在胃癌组织和相对正常胃黏膜中的表达差异并与蛋白检测的结果加以比较;而后,检测了胃癌组织中E-cadherin转录抑制因子Snail、E-cadherin启动子的甲基化状况,以期揭示E-cadherin mRNA与其蛋白下调之间的内在联系。材料和方法胃癌组织标本选自大连医科大学细胞生物学教研室(辽宁省高校癌症基因组学重点实验室)建立的人癌组织库。胃癌细胞系AGS购于中国科学院上海分院细胞库;BGC823从北京肿瘤研究所引进。采集的胃癌组织按Lauren分型分为肠型和弥漫型两个亚型,并以癌旁相对正常胃粘膜和癌前病变(萎缩性胃炎和肠上皮化生)作为实验对照。基于冰冻和石蜡组织微阵列(芯片),结合组织特定区域的DNA、RNA及蛋白定点捕获,应用免疫组织化学、RT-PCR、甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)和Western蛋白印迹分析等方法,检测E-cadherin和Snail在不同类型胃组织和胃癌细胞系