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目的:
1．检测前列腺癌组织RARβ2、GSTP1和DAPK基因的甲基化状态。
2．探讨RARβ2、GSTP1和DAPK基因甲基化在前列腺癌诊断中的价值。
3．探讨RARβ2、GSTP1和DAPK基因甲基化与前列腺癌临床病理特征间的关系。
方法:
1．根据Genebank中的RARβ2、GSTP1和DAPK DNA序列，在此三基因上分别设计外引物、甲基化引物及非甲基化引物各一对，建立巢式甲基化特异性PCR（nested methylation specific polymerase chain reaction，NMSP）方法，并对57例前列腺癌（PCa）组织和35例良性前列腺增生（BPH）组织进行甲基化检测，对结果阳性者再进行PCR产物克隆后测序。
2．分析其甲基化的发生与前列腺癌临床病理特征间的关系以及在前列腺癌诊断中价值。
结果:
1．前列腺癌组织中RARβ2、GSTP1和DAPK基因甲基化检出率显著高于BPH组织（RARβ2：52．6％vs0％；GSTP1：61．4％vs2．9％；DAPK：43．9％vs8．6％；P均<0．01）。
2．RARβ2、GSTP1和DAPK甲基化的发生与前列腺癌临床病理特征间的关系研究中发现：①RARβ2基因甲基化率在PCa不同Gleason评分和不同临床分期之间具有显著性差异（4～7分vs8～10分：34．8％vs64．7％，B、C期vs D期：37．0％vs66．7％，x2=4．927和5．004，P=0．026和0．025均<0．05）；②GSTP1基因甲基化率在不同Gleason评分间具有明显差异（4～7分vs8～10分：43．5％vs73．5％，x2=11．530，P=0．001<0．01），而在不同临床分期之间却无显著性差异（B、C期vs D期：51．9％vs70．0％，x2=1．975，P=0．16>0．05）；③DAPK基因甲基化率在不同Gleason评分和不同临床分期之间均无明显差异（4～7分vs8～10分：39．1％vs50．0％，B、C期vs D期：33．3％vs53．3％，x2=1．290和2．309，P均>0．05）。④D期中至少发生2个基因的甲基化率明显高于B、C期中的甲基化率（70．0％vs37．0％，x2=6．224，P=0．013<0．05）
3．RARβ2、GSTP1和DAPK基因甲基化在前列腺癌中诊断价值研究发现：GSTP1基因诊断敏感度最高为61．4％（35/57），其诊断特异度为97．1％（34／35）；RARβ2基因特异度最高为100％（35／35），其诊断敏感度为52．6％（30／57）；DAPK基因的诊断敏感度和特异度分别为43．9％和91．4％（25/57和32/35）。而RARβ2、GSTP1和DAPK基因甲基化联合检测能明显提高前列腺癌诊断敏感度，但诊断特异度却有所下降。
结论:
1．RARβ2、GSTP1和DAPK基因异常甲基化与前列腺癌的发生与发展相关。RARβ2基因异常甲基化与前列腺癌Gleason评分和临床分期关系密切；GSTP1基因甲基化与Gleason评分间相关。PCa病程的恶化程度和多个基因都发生甲基化有关。
2．RARβ2、GSTP1和DAPK基因联合检测能明显提高前列腺癌的诊断敏感度，可作为前列腺癌诊断的有效指标。