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目的：联合运用双向凝胶电泳(2-DE)和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术，研究膝关节骨性关节炎(KOA)与非KOA关节滑液蛋白质组表达图谱的差异，进一步阐述KOA的发病机制，寻找并初步明确KOA关节滑液中的特异性生物学标志，为该病的早期诊治、疗效监测和预后评估提供可靠的、准确灵敏的实验室参考指标。方法：收集2011年8月-2012年4月在解放军总医院行关节镜诊治的12例KOA患者与12例非KOA膝关节疾病患者（半月板损伤10例，盘状半月板2例，均无明显关节软骨损伤）关节滑液标本。KOA患者疾病严重程度分级采用Kellgren-Lawrence(KL)放射学分级标准。2-DE的第一向电泳采用固相PH梯度电泳，第二向采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析关节滑液蛋白质组成分。电泳后经质谱兼容银染，ImageMaster2D Platinum软件分析，将有统计学差异的蛋白质点胶内胰蛋白酶解，经MALDI-TOF-MS鉴定分析，定性后采用酶联免疫吸附试验(ELISA)定量分析部分具有潜在临床意义的蛋白。结果：KOA患者与非KOA膝关节疾病患者关节滑液相比较，经2-DE-质谱技术分析，共鉴定出31个具有统计学差异的蛋白(p<0.05)，差异点分布在pI3.0-10.0、分子量14.0kDa-97.0kDa之间。其中25个(80.6%)被认为具有潜在的临床意义。在这25个蛋白中，有12个(48%)结构蛋白，5个(20%)代谢酶类，2个(8%)转运蛋白，2个(8%)免疫球蛋白，4个(16%)其它类型蛋白。其中20个(80%)在KOA滑液中表达上调，5个(20%)表达下调。组织相容性白细胞抗原-DR(HLA-DR)、结合珠蛋白在KOA中表达上调，且与病情严重程度高度相关。结论：1.根据蛋白质不同的分子量和等电点，通过2-DE可分离关节滑液中蛋白质成分，并可利用分析软件找到KOA关节滑液中的差异蛋白质。2. KOA与非KOA相比，在关节滑液蛋白质组成分中存在差异。3.找到的某些差异蛋白质可能在KOA的发病机制中具有重要作用，并可作为特异性生物学标志用于该病的早期诊治、疗效监测和预后评估。