【摘 要】
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目的:促甲状腺激素释放激素（thyrotropin-releasing hormone,TRH）是第一个被分离和鉴定的下丘脑释放因子,其广泛分布于丘脑、脑干、脊髓腹角和中央管周围区等中枢神经系统。TRH及其类似物对与中枢神经系统相关的疾病有治疗作用,如可以治疗脊髓损伤、脊髓小脑病变,还可调节心血管功能,以及改善癌症患者的睡眠障碍。故本实验通过制备新生大鼠脊髓切片、应用脊髓运动神经元（motoneu
【基金项目】
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国家自然科学基金项目31271155；
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目的:促甲状腺激素释放激素（thyrotropin-releasing hormone,TRH）是第一个被分离和鉴定的下丘脑释放因子,其广泛分布于丘脑、脑干、脊髓腹角和中央管周围区等中枢神经系统。TRH及其类似物对与中枢神经系统相关的疾病有治疗作用,如可以治疗脊髓损伤、脊髓小脑病变,还可调节心血管功能,以及改善癌症患者的睡眠障碍。故本实验通过制备新生大鼠脊髓切片、应用脊髓运动神经元（motoneuron,MN）细胞内记录技术,观察TRH对脊髓MN突触传递的影响,尤其是观察TRH对脊髓内在调控运动神经元通路和下行通路的影响。方法:本实验选用814日龄新生Sprague-Dawley（SD）大鼠制备出400500μm横向脊髓厚片。应用细胞内记录技术对脊髓腹角MN进行记录,并给予脊髓同侧中央管周围区（ipsilateral pericentral canal,i PCC）和同侧腹外侧索（ipsilateral ventrolateral funiculus,i VLF）电刺激（单脉冲,波宽0.10.3 ms,10次/min,15100 V）在MN诱发出兴奋性突触后电位（excitatory postsynaptic potential,EPSP）,即诱发出i PCC-EPSP和i VLF-EPSP,待稳定记录15分钟后灌流所需浓度的TRH,观察TRH对脊髓运动神经元膜电学性质、i PCC-EPSP、i VLF-EPSP和i PCC-LTP的影响。结果:1.脊髓MN的基本电生理参数本实验共记录到的98个稳定的MN,测得MN的基本电生理参数为:静息电位:（-65.34±3.04）m V,动作电位幅度:（70.70±4.38）m V,超射:（5.37±1.96）m V,锋电位幅度:（53.76±5.67）m V,阈电位:（-49.56±4.26）m V,膜电阻:（98.60±43.45）MΩ。2.电刺激脊髓i PCC和i VLF诱发的i PCC-EPSP和i VLF-EPSP在实验记录到的57个MN,给予脊髓i PCC阈刺激以诱发出i PCC-EPSP,测得其细胞胞电生理参数为:曲线下面积:（42.29±26.10）m V·ms,幅度:（2.17±0.87）m V,时程:（52.52±16.33）ms。在实验记录到的17个MN,给予脊髓i VLF阈刺激以诱发出i VLF-EPSP,测得其细胞电生理参数为:曲线下面积:（46.25±46.55）m V·ms,幅度:（2.25±0.63）m V,时程:（48.95±26.99）ms。3.TRH对离体脊髓MN膜电学性质的影响对实验记录的30个脊髓MN,给予0.2μmol/L的TRH（510 min）细胞可产生去极化反应,并伴有膜电阻增大、增加MN的放电频率。在4个MN灌流0.2μmol/L TRH和1.0μmol/L TRH,细胞呈浓度依赖性去极化反应,上述反应用人工脑脊液（artificial cerebrospinal fluid,ACSF）冲洗后,可恢复至用药前水平。4.TRH对i PCC-EPSP及LTP的影响在脊髓i PCC给予电刺激诱发出i PCC-EPSP,待记录稳定后,灌流0.2μmol/L TRH,在3个MN的i PCC-EPSP上出现锋电位发放。在另外21个MN的i PCC-EPSP灌流0.2μmol/L TRH,可显著增加i PCC-EPSP的曲线下面积、时程、幅度和最大下降斜率,这提示TRH具有易化i PCC-EPSP作用。对1个MN灌流0.2μmol/L TRH,待反应稳定后给予强直刺激（100 Hz,50脉冲/串,波宽0.41 ms,共6串,串间隔10s）,强直刺激后i PCC-EPSP的幅度和曲线下面积增大到基础值的120%以上并持续30分钟以上,提示诱导出i PCC-LTP。5.TRH对i VLF-EPSP的影响在脊髓i VLF给予电刺激诱发出i VLF-EPSP,待记录稳定后,灌流0.2μmol/L TRH,在2个MN的i VLF-EPSP上出现锋电位发放。在另外5个MN的i VLF-EPSP灌流0.2μmol/L TRH,可显著增加i VLF-EPSP的幅度,其曲线下面积和时程也呈增大趋势,这提示TRH具有易化i VLF-EPSP的作用。结论:（1）TRH可以通过引起脊髓MN去极化和增加MN放电频率而兴奋脊髓MN。（2）TRH具有易化i PCC-EPSP的作用,可以影响脊髓内在调控通路而调节MN的活动。（3）TRH还具有易化i VLF-EPSP的作用,以增强脊髓下行激活而调节运动控制的输出。（4）TRH可能参与了脊髓MN i PCC-LTP的诱导。
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