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目的: 近年来研究证实,海马中可溶性β-淀粉样蛋白(Aβ)寡聚体的神经毒性是引起阿尔茨海默病(AD)患者认知功能减退的主要因素,Aβ的神经毒性作用可能与N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)有关。以往研究表明星形胶质细胞在参与突触的可塑性调控,参与神经的发生并影响神经元突触数目和位置等方面具有重要作用,NMDAR在海马神经元中有广泛分布,但在海马星形胶质细胞中是否有NMDAR亚单位的分布仍然存在争议,在Aβ作用不同时间后该部位的NMDAR亚单位是否出现变化尚无报道,因此该研究致力于探讨大鼠海马星形胶质细胞NMDAR亚单位的分布情况以及在Aβ作用下该亚单位表达变化特点。在此基础上我们进一步初步探讨NMDAR亚单位在Aβ作用下出现变化的可能机制。 方法: 我们以原代培养的大鼠海马细胞作为模型,分为海马细胞混合培养组(MIX组)和海马纯化星形胶质细胞组(AS组),加Aβ25-35(10μM)分别作用1h、24h后,应用免疫荧光染色方法检测对照组和加药组中NR1、NR2A和NR2B的表达变化情况。另外免疫荧光染色方法检测MIX组对照组和加药组中磷酸化NMDAR亚单位(P-NR2A和P-NR2B)的表达变化趋势。 结果: 1.MIX组:在对照组中星形胶质细胞表达NR1、NR2A和NR2B,经Aβ25-35作用后,三者表达均显著增强(P<0.05)。Aβ1h组和24h组相比,NR1无显著变化,NR2A、NR2B的表达随作用时间增加显著增强(P<0.05)。 2.AS组:在对照组中星形胶质细胞表达NR1和NR2B,经Aβ25-35作用后,二者表达均显著增强(P<0.05)。Aβ1h组和24h组相比,NR1表达显著增加后略有下降,NR2B的表达随作用时间增加显著增强(P<0.05)。星形胶质细胞在正常状态无NR2A亚单位的表达,Aβ1h组仍无明显表达,但是Aβ24h组有明显阳性表达。 3.在Aβ作用下,混合培养组(MIX组)中NR2比NR1亚单位反应更敏感,纯星形胶质细胞组(AS组)中NR1比NR2亚单位反应更敏感。 4.正常状态下海马星形胶质细胞有磷酸化NMDAR亚单位表达,而且在Aβ作用后P-NR2A表达显著减弱(P<0.05),P-NR2B表达显著增强(P<0.05)。 结论: 1.正常状态下(MIX-Con组)海马星形胶质细胞可表达NMDAR亚单位(NR1、NR2A和NR2B),Aβ作用会引起NMDAR各亚单位表达增强。 2.星形胶质细胞NMDAR的亚单位结构组成可能与神经元NMDAR不同。 3.在Aβ作用下,混合培养组和纯星形胶质细胞组NR1与NR2反应敏感性不同。 4.NR2亚单位可能通过其磷酸化状态调节NMDA受体离子通道的功能。