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目的；Wnt/β-catenin信号通路是研究得比较清楚的Wnt信号通路，通常被称为Wnt正规通路，该通路的激活与结肠癌的增殖、分化、侵袭和转移密切相关，其关键成分是β-catenin。正常情况下β-catenin依赖由GSK-3β、APC蛋白和Axin蛋白所形成的复合物磷酸化而降解，使胞浆中游离的β-catenin维持在极低水平，这对于Wnt信号通路的正常传导以及E-cadherin介导的细胞间黏附都具有重要作用。目前的研究发现，绝大多数结肠癌中存在APC基因的突变，突变的APC蛋白发生了“去顶”改变，导致β-catenin的降解障碍，引起细胞内β-catenin蛋白的积聚，进而穿梭入核与Tcf-4/Lef结合，启动靶基因的表达，最终导致细胞过度增殖、恶性转型及细胞间黏附功能的下降，促使结肠癌的发生发展。近年来，一种称作RNAi(RNAinterfering)的技术被成功应用于哺乳动物细胞，该技术可通过退火的双链siRNA转染细胞以高效而特异性地下调细胞内特定基因的表达。在本研究中，我们应用靶向β-catenin的siRNA瞬时转染LoVo细胞(人结肠癌细胞系，具有高转移特性，已知其APC基因已发生突变，细胞内存在β-catenin的异常表达)，拟通过RNAi技术抑制细胞中CTNNB1(β-catenin编码基因)基因的表达，以研究下调β-catenin水平后对LoVo细胞中E-cadherin、MMP7、CD44v6表达的影响以及LoVo细胞侵袭转移能力的变化，为下一步进行动物实验提供理论依据，最终为结肠癌的临床治疗寻找有效的作用靶点。
材料与方法；消化收集处于对数生长期的LoVo细胞，接种于6孔板。待其贴壁生长达80％～95％汇合时，将合成的靶向β-catenin编码基因mRNA的siRNA(长度21-mer，序列为：sense：5-AGCUGAUAUUGAUGGACAGdTdT-3，antisense∶5-CUGUCCAUCAAUAUCAGCdTdT-3’,其sense链5端标记绿色荧光蛋白FAM)通过脂质体LipofectamineTM2000介导转入LoVo细胞，以未经任何处理正常培养的LoVo细胞作为对照组，培养48h后消化收集细胞，荧光倒置显微镜下观察转染情况并通过流式细胞仪检测转染率，确定成功转染后分别用免疫细胞化学S-P法和RT-PCR检测转染组和对照组细胞内β-catenin在蛋白和mRNA水平的表达，在此基础上进一步检测该两组细胞中侵袭转移相关蛋白的表达，包括应用免疫细胞化学SP法检测细胞内E-cadherin和MMP7的表达水平、流式细胞术检测CD44v6的表达水平。最后通过细胞黏附实验、细胞迁移实验及体外基底膜侵袭实验来研究转染前后LoVo细胞的黏附、迁移和侵袭能力的变化情况。实验所得所有数据以(-x)±s(均数±标准差)表示，应用SPSS10.0统计软件处理数据，采用两样本t检验进行统计学分析，P＜0.05有显著性差异。
结果；1.siRNA在LipofectaminTM2000介导下转染LoVo细胞，经流式细胞仪检测转染率为72.36％，(转染条件：siRNA终浓度100nmol/L，体积比siRNA∶LipofectaminTM2000=10∶1)，表明已成功转染；
2.转染组与对照组相比，转染组β-catenin在蛋白和mRNA水平的表达均明显降低，其中在mRNA水平上的抑制率为76.2％；
3.免疫细胞化学SP法检测转染前后LoVo细胞中E-cadherin、MMP-7的表达，发现转染组E-cadherin表达较对照组明显升高，而MMP7表达明显下降；
4.流式细胞术检测转染前后LoVo细胞中CD44v6表达，结果显示在对照组LoVo细胞中CD44v6表达的荧光强度为9.51±0.83，阳性细胞率为13.29±4.04％；而在转染组LoVo细胞中CD44v6表达的荧光强度为4.74±0.45，阳性细胞率为7.73±3.08％，两者相比无论荧光强度还是阳性细胞率转染组较对照组均有明显下降(P＜0.001)；
5.细胞黏附实验发现转染前后LoVo细胞与细胞间的同质性黏附明显增强(t=-3.833，P＜0.01)，转染组和对照组的黏附率分别为30.1±6.％和21.5±5.1％；而细胞与FN之间的异质性黏附明显减弱(t=11.539，P＜0.001)，转染组与对照组的黏附率分别为46.8±6.6％和65.6±6.5％；
6.细胞迁移实验：划痕法结果显示24h后，对照组的无细胞条带变窄程度较转染组明显，转染组较24h前变化不明显；48h后，转染组无细胞条带仍较明显，而对照组无细胞条带已基本被增殖迁移的细胞填满，提示转染后细胞的迁移能力明显被抑制；
7.体外基底膜侵袭实验结果：转染组的侵袭细胞数为74.73±8.16/5个视野，对照组的侵袭细胞数为111.69±8.79/5个视野，转染组较对照组显著减少(t=6.955，P＜0.001)，提示转染后细胞的侵袭迁移能力被有效抑制。
结论；β-catenin靶向siRNA可明显降低LoVo细胞中β-catenin水平，进一步上调E-cadherin、下调CD44v6和MMP7的表达，对LoVo细胞的侵袭和转移有明显的抑制作用，这对于进一步阐明结肠癌的恶性进展机制以及下一步的动物实验、将来结肠癌的临床治疗都具有重要的意义。