蜂蜜是一种传统的天然保健食品,含有糖类、蛋白质、氨基酸、维生素、微量元素酸、色素、花粉、激素、微量活性成分等。蜜源不同,蜂蜜中的各种组分及其含量不同,即使是同一种类的蜂蜜,由于受气候条件、土壤成分、养蜂技术等诸多影响因素的存在,导致即使同一种蜂蜜其中的各个成分及其含量也不一样。高果糖浆由淀粉水解产生,其中的主要的糖成分和含量与蜂蜜基本一致,因此检测蜂蜜中掺伪高果糖浆一直是研究的难点,但是在蜂蜜中的主要成分的的含量比例是一定的,相对与人为将淀粉水解后的高果糖浆而言也是有一定的区别。本文通过糖类的薄层色谱法和淀粉酶的同工酶电泳的方法快速表征蜂蜜中的糖和淀粉酶。以便和高果糖浆加以区别,我们在蜂蜜的检测中做了以下几个方面的工作(1)对蜂蜜中的常规指标诸如水分,灰分,和酸度做了检测,水分和还原糖的含量共同影响着蜂蜜的粘度,灰分在一定的程度上可以反应蜂蜜中的蛋白含量,酸度则可以表示蜂蜜中的单糖的含量,蜂蜜的水分,灰分,酸度的数值都在规定的范围之内,而且可以看到二号糖浆的以上3个值更加的接近于蜂蜜。但是从这些指标的检测结果中很难看出蜂蜜和糖浆的实质区别,只能作为一个一般的质量测定的指标存在。(2)我们采用薄层色谱的方法对蜂蜜中的糖类进行了鉴别,首先通过化学滴定法测定了蜂蜜和糖浆的的葡萄糖,蔗糖,果糖,以及还原糖的含量,对蜂蜜和糖浆中的糖的主要组分有一个定量的判断,然后采用薄层色谱法进行蜂蜜中糖类成分的分析,通过对普通硅胶G板,高效硅胶G板和手工自制版3种固定相的筛选,我们最后采用普通硅胶G板作为我们薄层展层的固定相。在流动相的筛选中我们采用的3个不同体系的流动相作为展开剂,最后确定了甲醇-乙酸乙酯-水-氨水体系为最佳的展开系统,对甲醇-乙酸乙酯-水-氨水各个比例的微调确定了最佳比例为9:5:1:1.5,在这个比例下蜂蜜和糖浆的各个糖的组分都分离明显,相对于国家标准而言有很大的改进,薄层图片上可以分辨的斑点从3个提高为6个,且分离效果提升,最上端和最下端斑点的Rf值的差从0.18提升至0.31,从薄层色谱图上可以看到糖浆相对于蜂蜜而言在图的最下方多出2个斑点。(3)蜂蜜中含有α-淀粉酶及少量的自身转化酶,我们对蜂蜜中的淀粉酶进行酶活测定。采用了硫酸铵抽提蜂蜜中的淀粉酶,对抽提蛋白所使用的硫酸铵的饱和度从抽提后的蛋白含量以及抽提后蛋白的淀粉酶活性2方面进行了评价,最后确定了40%饱和度硫酸铵为最佳的饱和度,在这个饱和度下蛋白含量和蛋白中淀粉酶的活性都得到了最佳保持。最后采用了抽提后的蛋白进行了同工酶电泳检测。