骨组织工程种子细胞与支架材料的实验研究

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第一部分 应用密度梯度离心法分离扩增兔骨髓基质细胞的体会 目的:探讨密度梯度离心法分离培养兔骨髓基质干细胞(BMSc)的条件,为组织工程学选择合适的种子细胞奠定基础。方法:采用密度梯度离心法将兔BMSc自小量骨髓中分离并培养,研究其增殖和生长特性,绘制生长曲线,测定分裂指数和贴壁率。结果:兔BMSc在第7代以前性状稳定,生长曲线相似;第4天分裂指数最高为15%;传代后10小时贴壁率高达90%。结论:密度梯度离心法是分离兔BMSc的理想方法,BMSc能为未来组织工程提供足量种子细胞。 第二部分 骨髓基质细胞体外成骨能力的实验研究 目的:研究BMSc的体外成骨能力,为骨组织工程研究提供细胞来源。方法:采用密度梯度离心法将兔BMSc自小量骨髓中分离培养,并观察第二代BMSc在地塞米松、维生素C、β-甘油磷酸钠诱导条件下的生长及成骨分化情况。结果:BMSc呈成纤维细胞样表现,增殖能力强,在诱导条件下碱性磷酸酶活性明显增高,并出现矿化结节。结论:BMSc体外增殖能力强,成骨能力肯定。地塞米松、维生素C、β-甘油磷酸钠可促进BMSc向成骨细胞分化。
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