PD-L1是一种位于细胞膜表面的蛋白,可与效应T细胞上的PD-1及B7.1结合,通过传导免疫抑制信号,来抑制效应T细胞的活性。肿瘤表面PD-L1的表达成为肿瘤逃脱免疫细胞的追杀,造成肿瘤生长的重要原因。PD-1/PD-L1抗体已经成为临床治疗肿瘤的重要手段。目前PD-L1主要检测方法是对肿瘤进行侵入性穿刺后取得部分肿瘤组织进行免疫组化染色。这种检测手段会给病人带来生理上的疼痛,而且检测周期也比较长。因此需要开发新型的非侵入性检测方法。Affibody是一种衍生于葡萄球菌A蛋白Z结构域的人工蛋白质分子,它分子量小,在体内代谢速率快,适合用于分子成像诊断。本研究期望建立Affibody噬菌体文库,利用噬菌体表面筛选技术,得到与PD-L1特异性结合的亲和配体。本研究中将Affibody中编码13个可变氨基酸位点的密码子设计为NNK（N代表A、C、G和T,K代表G和T）的形式并合成引物,形成双链后插入到pCom3b XSS噬菌体质粒中。此外本研究比较了两种建库的方式,发现聚合酶链式反应（PCR）形成双链建库的效率是退火形成双链的5倍,在一定范围内,生长克隆数目与转化DNA的量正相关,并且存在转化上限。通过转化重组质粒到TG1感受态细菌中,我们得到了库容为2.38×10~8的Affibody文库,其中含有1/4的阴性克隆。在建库的基础上我们将开展固相淘选,以期筛选到与PD-L1特异性结合的亲和配体,为临床检测肿瘤中PD-L1的表达提供新策略。鱼腥草（Houttuynia cordata Thunb,HCT）是一种药用和食用草本植物,主要分布在亚洲地区。在药理学研究中,HCT可以通过减少炎症因子的释放以减轻肺损伤,还可以调节免疫力,增强阴道,口腔和肠道的免疫屏障。抗肿瘤作用也是HCT的生物功能之一,它能抑制肺癌,肝癌和乳腺癌细胞的生长。鱼腥草对皮肤鳞状细胞癌（Squamous-cell skin cancer,SCC）的作用尚未被检测。利用DMBA/TPA诱导小鼠SCC模型,我们通过局部治疗研究了HCT及其生物活性成分单体新鱼腥草钠的抗癌活性。HCT治疗后,测量小鼠背部肿瘤体积,直接反映HCT的治疗效果。肿瘤组织切片经H＆E染色观察肿瘤内部结构变化。通过Western blot检测了肿瘤组织中β-catenin、ATP结合盒转运蛋白（ATP-binding cassette sub-family G member 2,ABCG2）、CD4和CD8表达量的变化。为了进一步研究其分子机制,我们采用免疫荧光染色检测HCT治疗后肿瘤组织中浸润的CD4+和Foxp3+T调节细胞（Tregs）。此外,在体外HCT治疗后,用qPCR检测了SCC癌细胞中几种在招募免疫细胞中起重要作用的趋化因子。HCT及其生物活性成分单体有效地抑制了SCC的生长。HCT治疗后,肿瘤浸润性CD4+、Foxp3+T调节细胞（Treg）显著减少,CD8+/Treg细胞比率显著增加。HCT治疗后,SCC癌细胞中招募免疫细胞的几种趋化因子大量减少。β-catenin和ABCG2的表达量在组内和组间都存在差异。我们的研究结果证实了HCT对皮肤SCC的治疗作用,并表明它可能通过调节肿瘤浸润淋巴细胞和肿瘤免疫微环境来抑制癌症。