【目的】　　评估多重PCR探针熔解技术在婴幼儿肺炎支气管肺泡灌洗液中细菌病原学诊断的临床应用和价值。　　【方法】　　1. 研究对象　　将2016年10月至2018年2月在广东医科大学附属医院儿科收治的出院确诊为肺炎的行纤支镜检查的176例婴幼儿纳入登记表，对临床资料进行收集整理，筛选数据缺失的病例，最终共计选择120例。　　2. 制定登记调查表　　参照第八版《诸福棠实用儿科学》肺炎的临床诊断标准及相关文献，采集患儿的临床资料(详见附录二)。由两位高年资医师分别对患儿临床资料分析，年龄0岁—3岁，评判一致者纳入研究，在结果不一致的情况下，数据由第三名资深医师进行评估，两位医师获得共识者纳入研究，存在分歧者排除。最终共计选择120例，其中细菌感染组93例，非细菌感染组27例。本研究符合医学伦理学标准，获得医院伦理委员会批准，并征求患儿家属知情同意。　　临床诊断细菌性肺炎的纳入标准：　　① 符合肺炎，参照第八版《诸福棠实用儿科学》肺炎的临床诊断标准（发热、咳嗽、气促、呼吸困难和肺部固定性中细湿罗音；胸部X线或CT提示渗出性病变；重症肺炎患儿可累及循环、消化、神经等系统，在肺部表现的基础上出现全身其他系统受累的相应临床症状和体征）；② 无菌性体液细菌培养阳性（BALF定量培养出105CFU/mL及以上单一菌种；痰培养定量培养出107CFU/mL及以上单一菌种，或者两次以上培养出同一种细菌(105～106)CFU/mL）；③PCT≥0.5ng/mL；④CRP>8mg/L；⑤BALF中性粒细胞比例>20%；同时满足①、②或者①和③、④、⑤中任意两条者考虑临床诊断细菌性肺炎。　　排除标准：　　① 支原体感染；② 真菌感染；③ 严重免疫缺陷；④ 严重免疫抑制；⑤ 支气管异物患儿；⑥ 某些特殊肺部疾病如肺泡蛋白沉积症、肺结核等。　　3. 收集BALF　　样本收集后置于-80度冰箱储存。最后将样本置于含有冰块的保温瓶中将BALF标本寄送至厦门大学分子诊断工程研究中心。在1个PCR反应管内同时检测17种病原体及1个 mecA 耐药基因。本研究只对细菌感染进行分析(详见附录一)。　　4. 数据处理　　所有资料的处理均用SPSS20.0软件包进行分析，诊断效能的评价采用敏感度、特异度、约登指数等。对计数资料以数值及百分比表示，检测结果之间的比较采用χ2检验，计量资料采用非参数检验，P<0.05表示差异具有统计学意义。配对四格表采用Kappa值一致性检验。　　【结果】　　1. 在120例BALF中，细菌培养共分离出24株病原菌，均为单菌株。多重PCR探针熔解技术从67例标本（另外53例标本为阴性）中共检测出85株病原菌和肺炎链球菌1例、鲍曼不动杆菌1例分别携带mecA耐药基因，另外2种酿脓链球菌、大肠埃希菌未检出。　　2. 多重PCR的阳性率是67.7%，培养的阳性率是25.8%，差异具有统计学意义(P=0.0001)。多重PCR提高了较难培养细菌的检出率，且显著提高了肺炎链球菌（P=0.0001）、卡他莫拉菌（P=0.016）和金黄色葡萄球菌的检出率（P=0.002）。两种方法联合将病原菌的检出率从25.8%提升至74.2%。　　3. 本研究多重PCR的敏感度是0.677，特异度是0.852，且PCR结果与临床诊断的一致性尚可，该诊断试验有临床应用价值。　　【结论】　　多重PCR探针熔解技术能够高通量、快速诊断细菌性病原体，具有较好的敏感性和特异性，可帮助临床医生快速鉴别诊断婴幼儿肺炎支气管肺泡灌洗液中细菌性病原学的种类，减少不必要的抗菌药物的使用，减少耐药菌株的产生。