泛醌生物合成相关基因的研究及其产物的分析鉴定

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该课题对于微生物中泛醌(辅酶Q)产物的提取分析方法和泛醌生物合成相关基因进行了研究.将大肠杆菌(Escherichia coli)中分支酸裂解酶编码基因(ubiC)和4-羟苯甲酸聚八异戊二烯转移酶编码基因(ubiA)克隆到T7启动子下游增强其表达,使受体菌的辅酶Q<,8>产量为对照菌的3倍.接着,又将弱氧化葡糖杆菌(Cluconobacter suboxydans)聚十异戊二烯焦磷酸合成酶编码基因(ddsA)转入大肠杆菌十种不同受体菌中,通过产物分析证实该基因能在大肠杆菌中表达出有活性的聚十异戊二烯焦磷酸合成酶,从而使大肠杆菌合成了原先并不产生的辅酶Q<,9>和辅酶Q<,10>.结果显示,不同的菌株辅酶Q<,10>的合成量不尽相同,其中以HB101/pLD5、DH5α/pLD5和MM294S/pLD5在个菌株为优.另外,还对荚膜红细菌(Rhodobacter capulatus)的聚异戊二烯焦磷酸合成酶基因进行了初步研究.
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