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猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS）又称“猪蓝耳病”、“猪神秘病”等,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）引起的一种猪专一宿主的免疫抑制性疾病。经典毒株主要引起怀孕母猪繁殖障碍及仔猪呼吸道疾病。高致病性变异毒株引起急性热性高致死性的疾病,为我国一类传染病。20世纪90年代Lelystad（LV）毒株和VR-2332毒株分别在荷兰和美国被分离,随后该病毒在亚洲暴发。1995年,中国爆发了经典PRRS的疫情,随后PRRSV在中国不同地区广泛传播。2006年,高致病性PRRSV在中国暴发。2010年-2012年,我国先后出现了重组毒株和类NADC30毒株,给我国养猪业造成了巨大损失。目前,猪繁殖与呼吸综合征不断有新的突变毒株出现,成为我国乃至全球的养猪业重要疫病之一。为了解近几年山东省PRRS的流行情况,本研究对2018-2020年采集的来自山东省各地不同规模猪场疑似PRRS的临床病例样品进行检测,对该病在山东省的流行特征进行分析。本研究基于2018年至2020年本实验室采集的来自山东省各地不同规模猪场PRRS的临床病例样品进行检测,对该病在山东省的流行特征进行分析。通过临床症状观察、剖检病变观察、病理组织学观察、PRRSV病毒分离纯化、PRRSV抗体ELISA检测分析,并对GP5蛋白基因遗传演化、主要氨基酸突变以及GP5潜在N-糖基化位点进行检测分析,进一步认识山东省PRRS流行病学特征。经调查结果显示,感染PRRSV的不同阶段的猪表现为呼吸道症状及生产母猪繁殖障碍。感染PRRSV的重症猪只剖检病变主要表现为肺脏的间质性肺炎。我们共采集来自山东各地2143份猪的病料,经RT-PCR检测发现PRRSV阳性数为355份,阳性率为16.57%,混合感染病例中PRRSV与PCV2混合感染率最高;对山东省不同规模猪场PRRS的发病情况进行调查发现以秋冬季最为严重,另外2018-2020年PRRSV感染阳性率呈略微下降趋势;对11247份血清样品进行了PRRSV N蛋白抗体ELISA检测,抗体总阳性率为78.86%（8869/11247）,表明山东省不同规模化猪场PRRSV抗体阳性率均呈较高态势。为了进一步对PRRSV的遗传分子特性进行研究,对阳性样品进行病毒分离鉴定及测序,筛选出了70株PRRSV GP5蛋白基因。通过遗传进化分析发现,山东省规模化猪场流行的PRRSV均为2型,主要分布于五个分枝上,表明山东省PRRSV流行毒株复杂多样。ORF5编码GP5蛋白,R13和R151与病毒的致病能力有关,这两处均为R时表现为强毒株。在推导氨基酸突变位点分析中,Lineage 1中的分离毒株出现了R13的突变,表现为强毒特征;Lineage 3中,只有一株表现为强毒株特征;处于Sub Lineage5.1的分离株未发现强毒株特征;处于Lineage 8的毒株均有R13的突变。GP5是PRRSV重要中和抗原表位,某些GP5氨基酸的突变对PRRSV的毒力影响较大,有些抗原表位在PRRSV诱导免疫应答中起着关键作用。位于Lineage1的分离毒株,大部分具有与NADC30毒株一样的中和抗原表位;位于Lineage3的毒株只有一处发生了A27LVS的突变;在Lineage8中出现了N30D和L28P两处AA替代。这些抗原表位的改变可能导致了病毒的进化,从而影响疫苗的免疫效果。有研究报道GP5的病毒外序列中有四个潜在的N-糖基化位点,这些N-糖基化位点对病毒感染、呈递抗原和病毒对体外中和抗体的敏感性具有非常重要的作用。本研究中的测序株有3-5个N-糖基化位点,在N44和N51处表现出了N-糖基化位点的高度保守,于Lineage 1的分离毒株在N34处出现了缺失,在N30、N33和N35处出现了新的N-糖基化位点;位于Lineage8的分离毒株在N30和N35处N-糖基化位点缺失,在N33处为缺失,在N34处缺失和突变。这些毒株的缺失、突变及增加可能增强PRRSV对中和抗体的抵抗能力和导致疫苗的免疫失败。综上所述,目前山东省猪场PRRSV感染压力较大,虽然大多数猪场使用了PRRSV疫苗进行高强度免疫,但由于毒株类型复杂多样,使得疫苗的免疫效果不尽理想,有些免疫猪场仍出现发病病例,并造成较为严重的经济损失,因此加强PRRSV流行病学调查,健全生物安全体系,本研究进一步丰富了山东省PRRS的流行病学资料,为该病的疫苗研制及免疫防控奠定了理论基础。