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毛囊发育形态结构特征及发育规律不仅是其生物学特征的重要内容,而且是皮肤内相关信号分子相互作用的结果。毛囊形态发生依赖于一系列的信号通路分子的调控,这些信号分子介导真皮细胞和上皮细胞之间的相互作用,诱导、激发两个细胞群体的有序增殖和分化,并最终形成发育成熟的毛囊,其中Wnt10b/β-catenin、FGF18基因在毛囊发育过程中发挥重要作用。本研究以甘肃超细毛羊胚胎体侧部皮肤为材料,采用组织学技术、实时荧光定量PCR技术、免疫组化技术,开展甘肃超细毛羊胎儿皮肤组织形态结构变化规律、Wnt10b/β-catenin、FGF18基因在皮肤毛囊中转录、蛋白水平的表达规律的研究,为阐明Wnt10b/β-catenin、FGF18基因在甘肃超细毛羊毛囊形态发生、发育过程中的分子调控机制提供理论基础。研究结果如下:1.甘肃超细毛羊胎儿体侧皮肤中,胎龄第81d胎儿表皮发育完整,真皮逐渐分化出乳头层和网状层。胎儿体侧部初级毛囊原始体最早发生在胎龄第87d,次级毛囊的原生体最早出现在初级毛囊内侧的膨大部,原生体可进一步发育形成次级毛囊的毛芽。在原始次级毛囊发育后期,可分化出再分化次级毛囊。初级毛囊在胎龄第102~123d发育速度最快,胎龄第123~141d发育变缓;次级毛囊原始体最早发生在胎龄第96d,在胎龄第102d~117d次级毛囊发育速度最快。胎龄第111d,毛囊内出现毛囊尖端角质化纤维,在胎龄第117~120d可见绒毛穿出体表。形成的毛囊群主要为三元毛囊群,胎龄第126dS/P达到最高值9.96。2.甘肃超细毛羊胎儿体侧皮肤中,采用定量RT-PCR技术研究结果显示在胎龄第87d~108d胎儿皮肤中Wnt10b基因mRNA表达量逐渐升高,在胎龄第108d达到最大值43.652±0.425;在胎龄第117d~141d,Wnt10b基因mRNA表达量为39.747±0.628~37.57±0.216。免疫组化研究结果显示在胎龄第108d~111d,Wnt10b蛋白在毛芽细胞质中呈阳性表达,而细胞核呈阴性表达;在胎龄第117d~123d,毛囊的外根鞘、内根鞘及毛干细胞质细胞核中Wnt10b蛋白呈强阳性表达,少量毛母质细胞质呈阳性表达,而真皮乳头细胞质细胞核呈阴性表达。3.甘肃超细毛羊胎儿胎龄第87d~141d,采用定量RT-PCR技术研究结果显示β-catenin基因mRNA相对表达量为1±0.268~0.163±0.133。免疫组化技术研究结果显示在胎龄第87d~141d,β-catenin蛋白在胎儿皮肤上表皮细胞质细胞核中呈阳性表达;在胎龄第108d~111d,毛芽结构细胞质细胞核中β-catenin蛋白表达呈阴性表达;在胎龄第117d~135d,毛囊中内根鞘、外根鞘及毛干部细胞质细胞核中β-catenin呈阳性表达,毛母质和真皮乳头细胞质细胞核呈阴性表达。4.甘肃超细毛羊胎儿皮肤毛囊发育过程中,RT-PCR研究结果显示,在胎龄第87d~108d,FGF18mRNA相对表达量逐渐升高,在胎龄第108d达到最大值13.67±0.207;在胎龄第111d,FGF18mRNA相对表达量下降至2.017±0.421,到胎龄第141d,FGF18mRNA相对表达量为11.67±0.523。免疫组化技术研究显示FGF18蛋白在胎儿表皮、真皮细胞质细胞核中呈阳性表达;在102d~108d,毛芽细胞细胞质中FGF18蛋白呈强阳性表达,细胞核呈阴性表达。在111d~123d,FGF18蛋白在毛囊的外根鞘、内根鞘及毛干细胞质细胞质中呈强阳性表达,FGF18蛋白在毛母质细胞质呈阳性表达,少量真皮乳头细胞质呈阳性表达。研究结果表明:在甘肃超细毛羊中再分化次级毛囊来源于原始次级毛囊或再分化次级毛囊的颈部膨大部分支而不是直接来源于表皮,次级毛囊密度/初级毛囊密度比值大小可直接反应羊毛品质。Wnt10b在毛囊的形态发生和分化中发挥重要作用。β-catenin在胚胎皮肤毛囊发生、发育过程中起维持上皮-间质中其它信号转导的作用。FGF18在胎儿皮肤形成及其皮肤附属物形态发生、发育过程中发挥了重要作用。但FGF18在毛囊形态发生及分化过程中的分子调控机制还有待进一步的研究。