整联蛋白是一种重要的细胞黏附分子，以受体-配体结合的形式发挥作用，介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质(ECM)间的相互作用。上皮组织发育和功能需要整合来自局部细胞微环境和远程激素的信号。在决定细胞命运的不同类型局部信号中，细胞黏附到ECM是最为重要的。整联蛋白是一类主要的将细胞黏附到ECM的细胞表面受体，通过细胞骨架组织细胞形状，它们也影响细胞命运的决定。整联蛋白参与细胞识别与结合、活化和信号转导，参与细胞增殖、存活、迁移、分化以及细胞的伸展和转移，是免疫引导、炎症反应、凝血、肿瘤转移、创伤愈合等一系列生理和病理过程的基础。　　 新的观点认为整联蛋白监控细胞的外环境，进而使细胞具备了条件依赖性激素和生长因子信号的检验点。然而，对正常上皮发育机制和异常性机制的全面了解仍然是一个重要挑战，这需要清楚细胞-ECM相互作用如何影响下游生物效应，并且剖析特异性的调控方式。本研究的目的在于揭示整联蛋白α6、β4的表达和奶牛乳腺发育与泌乳之间的关系，以及催乳素(PRL)、生长激素(GH)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子-2(IGF-2)和层黏连蛋白(LN)调控整联蛋白α6、β4表达的分子机制，为奶牛乳腺发育和泌乳机制的研究提供基础资料，为人工调控乳质量和乳产量提供可行的技术手段和理论支持。　　 本研究以荷斯坦奶牛乳腺为实验材料，应用荧光定量RT-PCR、Western blotting及免疫荧光技术，检测不同发育阶段奶牛乳腺组织中整联蛋白α6、β4的表达定位；以体外培养的泌乳期奶牛乳腺上皮细胞为模型，确定LN对于整联蛋白α6、β4表达的影响，及其与PRL、GH、IGF-1和IGF-2调控乳腺上皮细胞增殖和泌乳性能的串话效应。　　 研究结果表明，整联蛋白α6、β4在奶牛乳腺发育的不同时期均有表达，但各个时期的表达量发生变化。其中，整联蛋白α6在妊娠期显著高于其他发育时期(P<0.05)，妊娠中期达到峰值；整联蛋白β4在青春期和妊娠期显著高于其他发育时期(P<0.05)，妊娠中期达到峰值。其相对表达量呈正相关。这与荧光定量RT-PCR结果相似，妊娠末期整联蛋白α6的相对表达量达到峰值；青春初期，整联蛋白β4的相对表达含量达到峰值。　　 实验中用组织块培养法成功获取了泌乳期奶牛乳腺上皮细胞。LN与不同泌乳相关激素和生长因子对整联蛋白α6、β4的相对表达量有促进作用，其中GH和IGF-1处理组变化显著(P<0.05)；LN对整联蛋白β4的促进作用显著(P<0.05)。MTT技术检测，结果表明LN促进整联蛋白α6、β4表达时同步诱导细胞黏附，IGF-1和IGF-2促进细胞黏附作用；整联蛋白α6、β4参与细胞增殖，而LN对细胞增殖有显著的促进作用，但在PRL和IGF-2协同作用下具有促细胞存活作用。检测乳糖、乳脂和乳蛋白合成分泌情况，结果表明整联蛋白α6、β4对奶牛乳腺细胞的乳糖、乳脂合成具有正向调控作用；PRL、GH、IGF-1和IGF-2对乳蛋白的合成有正向调控作用；而LN对乳糖、乳脂和乳蛋白合成无显著调控作用。　　 总之，本研究从细胞.细胞外基质相互作用的角度，验证了奶牛整联蛋白家族成员α6和β4及其配体-层黏连蛋白的泌乳相关作用及其调控机制，并为奶牛乳腺发育和泌乳调控提供了新的研究方法和思路。