目的:建立乙型肝炎病毒S基因直接测序分型方法,初步探讨HBV基因分型与临床之间的关系。 方法:应用聚合酶链反应(PCR)扩增HBV DNA S基因区,通过直接测序方法进行分型和Genebank标准序列对比来鉴别HBV A～H基因型:对165例慢性无症状乙肝表面抗原携带者(ASC)、急性肝炎(AH)、慢性肝炎(CHB)、肝硬化(LC)和重症肝炎(SH)的乙肝患者血清进行基因分型,并对20例患者血清进行HBV S区直接测序重复性分型实验,以验证此分型技术的稳定性和特异性。 结果:基因分型重复实验复合率100%;165例乙型肝炎患者中HBV基因型B型20例(12.1%),C型143例(86.7%),D型1例(0.6%),B、C混合型1例(0.6%)。在B型和C型中,ASC、AH、CHB、LC和SH的构成比差异有非常显著性(X~2=11.27,P<0.01),C型和B型相比,C型中CHB所占的百分比显著高于B型(69.2%比45%,X~2=4.61,P<0.05),而LC所占百分比差异无显著性;基因C型感染的病人中eAg阳性率显著高于基因B型感染的病人(63.6%比35%,X~2=6.00,P<0.05),而基因型C型感染的病人中HBeAb阳性率显著低于基因B型感染的病人(X~2=7.16 P<0.01)。 结论:1.应用HBV DNA S基因序列直接进行基因分型,不仅简化了传统的全基因序列分型法,而且具有良好的敏感性、特异性和稳定性,且操作简便,为应用于临床和流行病学调查研究奠定了实验基础。