黄海贝类养殖区腹泻性贝类毒素特征及变化规律研究

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贝类毒素(shellfish toxin)是指主要由有毒藻类产生、能够在海洋生物特别是双壳贝类体内富集,并对其它生物包括人类产生危害的一类小分子有毒化合物。其中,腹泻性贝类毒素(diarrhetic shellfish poisoning,DSP)是一类最早从贻贝组织中提取,使人产生腹泻、恶心、呕吐等中毒症状的贝类毒素。近几年,由于经济粗放式的高速增长造成的环境污染日益严重,水体富营养化等因素造成赤潮频发,其对贝类安全的影响逐渐扩大,阻碍了我国贝类出口贸易,严重威胁着消费者的健康。DSP中毒事件时有发生,调查发现中国沿海部分贝类样品毒素污染严重,北黄海、黄海胶州湾、浙南海域、福建海域、广东近海等海域均有腹泻性贝类毒素的检出。因此,加强对DSP特征和变化规律的研究,保证贝类安全十分必要。目前,国际上对DSP的监测方法包括直接采集贝类进行毒素检测,通过观察海水中有毒藻类进行间接推断,以及利用有毒藻类在海水中释放的毒素进行示踪推测。近年来,利用固相吸附毒素示踪(solid phase adsorption toxin tracking,SPATT)技术监测有毒藻类在海水中释放毒素的方法得到较快发展。SPATT技术利用吸附剂吸附海水中毒素模拟滤食性贝类富集毒素的过程,可以实现对贝类毒素的连续监测。本文利用SPATT技术,在2015年分别对黄海灵山湾和海州湾贝类养殖区海水中腹泻性贝类毒素进行了定期的毒素吸附采样,7天为一个采样周期。结合液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)方法对样品中大田软海绵酸(okadaic acid,OA)、鳍藻毒素-1(dinophysistoxin-1,DTX1)、鳍藻毒素-2(dinophysistoxin-2,DTX2)和蛤毒素(pectenotoxin-2,PTX2)进行分析。在黄海灵山湾和海州湾贝类养殖区海水中分别检出腹泻性贝类毒素OA、DTX1和PTX2,均未检出DTX2。其中,主要检出成分是OA和PTX2,两者含量占毒素总量的90%左右。在黄海灵山湾养殖区海水中,OA和DTX1含量随时间变化较大,出现了多个相近的高峰值,分别在7月17日和10月2日含量达到最高,分别是196.07 ng/g resin和62.64 ng/g resin;PTX2含量随季节变化明显,6-10月份含量较高,在7月17日含量最高,达到250.99 ng/g resin;在7-8月份中旬,受生长环境影响,PTX2含量会高于OA含量;DSP波动较大,在7月17日含量最高,达到491.42 ng/g resin。在黄海海州湾海域海水中,OA、DTX1和PTX2季节性变化明显;OA在8-12月份含量较高,在9月2日最高,达到605.96 ng/g resin;DTX1在7-10月含量较高,在8月26日最高,达到106.41 ng/g resin;PTX2在5-8月份含量较高,维持在198 ng/g resin以上,8月4日含量最高,达到341.26 ng/g resin;在4月12日-8月18日期间,受生长环境影响,PTX2含量高于OA含量;DSP季节性变化,在8-10月份含量较高,9月2日最高达677.34 ng/g resin。黄海海域海水中腹泻性贝类毒素存在年度差异和地域差异。海水中OA、DTX1和PTX2含量与海水温度存在正相关性。本文通过定期采集了黄海灵山湾和海州湾贝类养殖区牡蛎、扇贝和贻贝样品,利用LC-MS/MS方法对腹泻性贝类毒素进行分析,发现牡蛎、扇贝和贻贝样品中DSP检出成分相同,包括OA、DTX1和PTX2,均未检出DTX2;通过比较黄海灵山湾和海州湾贝类中OA、DTX1和PTX2的检出率和超标率,发现海州湾DSP检出率较灵山湾高;黄海灵山湾和海州湾贝类中OA、DTX1和PTX2存在种间差异、地域差异和季节差异。贻贝和扇贝的OA、DTX1富集能力较强,牡蛎最弱,而对PTX2的富集能力相反;海州湾海域相比灵山湾海域,发现了PTX2超标样品,DSP污染较严重;DSP在春夏季节检出率较高。通过分别对贝类中OA、DTX1自由态和酯化态含量对比分析,发现酯化态含量分别高达总量的27.57%和40.74%。
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