大蒜活性物质——有机硫化物的提取

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大蒜植株(Allium Sativum L.)是百合科葱属植物,它的鳞茎就是大蒜。大蒜素是大蒜鳞茎破碎后,蒜氨酸在蒜氨酸酶催化作用下产生的一种具有生物活性的有机硫化物。其具有广谱的抗细菌和真菌的作用,具有清除动物体内自由基,防止肿瘤和脑心血管疾病的作用,还具有提高生物体免疫能力等等许多作用。大蒜素药理作用及疗效广泛,可用于多种疾病的防治,在临床上应用越来越广泛。是一种非常有前景的天然药物。大蒜素(二烯丙基硫代亚磺酸脂)比较活泼,受热、暴露在空气中或在有机溶剂中很不稳定,容易降解成活性很小的有机硫化物,因此大蒜素的有效提取一直是一个难题,其保藏也是一个比较有挑战性的课题。大蒜素粗品(大蒜油)的提取方法可以分为三大类:酶法水蒸气蒸馏法、有机溶剂提取法及超临界CO2萃取法。酶法水蒸气蒸馏法提取的大蒜油杂质少,但是活性物质大蒜素的含量非常低。超临界CO2萃取法得到的大蒜油则杂质含量高,后处理麻烦。本课题采用酶法乙醚萃取法提取大蒜素粗品(大蒜油)。在大蒜破碎酶解反应后,经过初步除杂,用乙醚萃取大蒜素。实验发现大蒜<WP=6>素粗品易溶于乙醚。本实验从改进定硫法开始,确定了改进后的定硫法检测操作过程和步骤。经硫酸钡实验和定量滤纸空白试验证明了改进后的可行性。接着做了酶解反应后萃取剂的选择实验,通过乙酸乙酯和乙醚在萃取时间和萃取用量实验的比较,发现乙醚在萃取大蒜油上要优于乙酸乙酯很多。进而选定乙醚作为酶法后提取的萃取溶剂。随后从单因素考察实验开始,对酶解反应的温度、pH值、加水量、酶解反应时间、离心前pH值等因素进行了考察。得到了大蒜有机硫化物的较高得率的大致范围。最后做了两组正交实验考察显著性因素和一组确定最佳提取条件的正交实验。结果显示,酶解反应时间、温度、加水量和离心前pH值对大蒜有机硫化物的得率比较显著的影响。结果通过正交实验确定了提取的最佳条件为:A1B2C2D2H4,即控制提取条件为:酶解反应温度,25℃;酶解反应时间,60min;加水量,100mL;酶解反应pH值,7.0;离心前pH值,3.2;并经验证在此最佳条件操作下,大蒜有机硫化物的得率为0.188%。
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