乌龙茶多酚对肠道菌群和肝脏基因昼夜节律作用研究

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茶叶在世界范围内,都广受人们欢迎。乌龙茶是一种半发酵茶,虽然它含有多种化合物,但其有效成分主要归因于多酚部分。茶多酚是重要的生物活性物质,一直以来成为医药和食品研究领域的热点之一。鉴于此,本研究以乌龙茶为原料,分别对其多酚的提取工艺、对肠道微生态的调节功能和对肝脏时钟基因的调节作用进行了研究。主要结果如下:1、选择提取因素(液料比、提取温度和提取时间),进行单因素试验。基于单因素试验,选择提取参数的组合进行三因素三水平的中心组合设计实验。然后通过DesignExpert软件分析数据,获得乌龙茶多酚(oolong tea polyphenols,OTP)的最佳提取参数:液料比17 mL/g、提取温度91°C、提取时间42 min,茶多酚的产量最高达到140.24 mg/g。2、采用16S rDNA测序技术,分析了OTP对昼夜紊乱小鼠肠道菌群多样性和特定菌群丰度的影响。结果发现,OTP干预8周后,小鼠肠道菌群多样性和节律性OTU的数量得到改善;在门水平上,观察到拟杆菌门(Bacteroidetes)相对丰度的升高和厚壁菌门(Firmicutes)丰度的降低,并且Firmicutes/Bacteroidetes(F/B)的比值也显示出显著降低;改善了由持续黑暗引起的拟杆菌门(Bacteroidetes)、厚壁菌门(Firmicutes)和变形菌门(Proteobacteria)的周期性变化;在属水平上,提高了小鼠肠道菌群中普雷沃氏菌属(Prevotella)和拟杆菌属(Bacteroides)的相对丰度,降低了梭菌属(Clostridium)的相对丰度;显著改善了普雷沃氏菌属(Prevotella)、拟杆菌属(Bacteroides)和梭菌属(Clostridium)的周期性变化。3、采用转录组测序技术,评估了OTP对昼夜紊乱小鼠肝脏基因的影响。结果发现,OTP干预8周后,提高了小鼠肝脏中具有节律性的基因数量并改善了肝脏时钟基因(Bmal1、Clock、Cry1、Cry2、Per3和Sirt1)的表达水平;CD-OTP组与CD组差异基因GO富集分析显示,这些基因主要富集在转录调控与DNA模板化、转录与DNA模板化、细胞质、细胞膜、蛋白质结合和金属离子结合等通路;OTP干预后差异基因富集的KEGG通路主要包括粘着斑(9 DEGs)和PI3K-Akt信号传导途径(9 DEGs);差异基因显著富集的途径主要包括类固醇生物合成、萜类骨架生物合成和粘附连接等。
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