论文部分内容阅读
非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者占肺癌患者总数的约80%,大多数非小细胞肺癌患者确诊时已到晚期,不适合进行外科手术治疗而主要依靠化疗治疗。以铂类药物为主的联合用药化疗方法是目前治疗晚期非小细胞肺癌的主要方法。但是铂类联合用药疗法会产生一系列毒副反应,而且在不同的患者个体间毒副反应的程度、化疗的疗效都会有较大差别。内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)是维持细胞内稳态平衡的重要机制,但是过度的内质网应激又会引发细胞凋亡,它与许多人类疾病的发生、发展以及预后关系密切。本研究通过对内质网应激通路的8个相关基因(HSPA5、HSP90B1、 XBP1、VCP、CALCR、CANX、MAPK3、EIF2S1)共39个单核苷酸多态位点与晚期非小细胞肺癌含铂化疗的疗效、毒副反应进行关联研究,以期能够找到关联显著的多态位点作为遗传标记,为晚期非小细胞肺癌含铂化疗提高疗效、降低毒副反应的个性化疗法提供借鉴和依据。关联分析的结果显示,VCP基因rs2074549位点变异纯合子CC在化疗方案为顺铂+长春瑞滨的分层中极显著的增加了发生白细胞毒副作用的风险[P=7.490E-05,OR(95%CI)为7.690(2.802-21.110)],也极显著的增加了发生粒细胞毒副作用的风险[P=1.851E-05,OR(95%CI)为11.960(3.877-36.920)]；在>58岁的人群中极显著的增加了发生粒细胞毒副反应的风险P=4.476E-04, OR(95%CI)为3.967(1.838-8.563)]。在对由rs1053318、rs2074549、rs514492构成的单倍域作单倍型分析时,在接受化疗方案为顺铂+长春瑞滨的分层中,单倍型GCT极显著的增加了发生粒细胞毒副作用的风险[P=3.943E-04,OR(95%CI)2.949(1.622-5.363)]。XBP1基因rs2269577位点变异纯合子GG在腺癌分层中极显著的增加了发生胃肠毒副作用的风险[P=3.432E-04,OR(95%CI)为4.103(1.894-8.885)]。此外,其它基因的多个SNP也与晚期非小细胞肺癌含铂化疗的疗效、毒副反应体现出了不同程度的相关性。为了探究XBP1基因及其多态位点rs2269577在晚期非小细胞肺癌含铂化疗发生胃肠道毒副作用中所起的作用,我们首先分别在GES-1细胞和HEK293细胞中检测了细胞经顺铂处理后XBP1mRNA水平的变化,发现在GES-1细胞中XBP1mRNA水平显著下降,与在HEK293细胞中的趋势相反。然后我们将rs2269577位点所在的XBP1基因调控区克隆进pGL3-Basic载体,分别构建包含2种等位型的重组子即XBP1-pGL3-Basic-C和XBPl-pGL3-Basic-G,在HEK293细胞以及GES-1细胞中进行双荧光素酶检测,发现G等位型使萤火虫荧光素酶表达量显著降低。由此我们推断,在胃肠道细胞中,顺铂处理使XBP1mRNA水平下降,而rs2269577位点C>G进一步削弱了XBPl的转录起始效率,两者的共同作用导致rs2269577与铂类化疗中胃肠道毒副反应的发生风险产生关联。