【摘 要】
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为探索脂溶性活性物质与纳米硒联用的新策略,本研究利用O/W型皮克林（Pickering）乳液中油、水分别为分散相和连续相,稳定剂吸附于油水界面的独特结构,提出以茶褐素等同一稳定剂在油水界面同时稳定纳米硒和乳液,构建高稳定性的纳米硒乳液。首先以普洱茶的茶褐素为模板合成纳米硒,利用动态光散射等技术分析其直径、电位,建立茶褐素-纳米硒制备方法;进而利用电子显微镜等表征其形貌、晶型、价态,利用人源肿瘤细胞
【基金项目】
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农业部-现代茶叶产业技术体系专项资金（CARS-19）； 国家自然科学基金（31901652）；
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为探索脂溶性活性物质与纳米硒联用的新策略,本研究利用O/W型皮克林（Pickering）乳液中油、水分别为分散相和连续相,稳定剂吸附于油水界面的独特结构,提出以茶褐素等同一稳定剂在油水界面同时稳定纳米硒和乳液,构建高稳定性的纳米硒乳液。首先以普洱茶的茶褐素为模板合成纳米硒,利用动态光散射等技术分析其直径、电位,建立茶褐素-纳米硒制备方法;进而利用电子显微镜等表征其形貌、晶型、价态,利用人源肿瘤细胞模型评价其抗肿瘤活性。同时,以茶褐素为稳定剂制备Pickering乳液,分析其直径、电位和微观结构,并研究其贮藏稳定性。在此基础上,利用茶褐素对纳米硒和Pickering乳液的稳定作用,构建茶褐素-纳米硒Pickering乳液。以筛选的普洱茶水提取物和玉米醇溶蛋白-壳聚糖复合物（Zein-Cs）稳定剂,建立其纳米硒乳液的制备方法,探究其稳定特性,并比较茶褐素、普洱茶水提取物、Zein-Cs-纳米硒乳液的贮藏稳定性。主要研究结果如下:（1）成功制备茶褐素-纳米硒并评价其抗癌活性:当茶褐素添加量为500 mg/L,先添加Na2SeO3,后添加VC,VC/Na2SeO3配比为4:1,40℃下反应30 min,11000r/min离心2次时,可制备直径30～50 nm、均匀分散的球型纳米无定形零价单质硒,其静电稳定性高（Zeta电位:-63.13±1.18 mV）,具有较强的抑制癌细胞增殖作用,且对人结肠癌细胞HCT 116的抑制作用(IC50=84.13±2.68μg/mL)显著强于人宫颈癌细胞Hela(IC50=47.01±1.11μg/mL)。（2）以茶褐素为固体粒子制备的Pickering乳液粒径较小（2.61±0.02μm）,静电稳定性高（-51.83±1.52 mV）,在25℃下可保存35 d以上。以茶褐素为稳定剂构建的纳米硒-Pickering乳液粒径小（1.85±0.01μm）、静电稳定性高（-31.6±1.07 mV）,纳米硒均匀分散,直径为60～100 nm。（3）成功构建普洱茶水提取物-纳米硒乳液并评价其稳定性:当普洱茶水提取物浓度为4%,大豆油/水比例为4:6,VC/Na2SeO3配比为4:1,Na2SeO3浓度为10 mM时,该纳米硒乳液均一,平均粒径为3.81±0.02μm,静电稳定性高（-41.23±0.75 mV）,20～40℃、pH 3～8下可维持高稳定性。（4）成功构建Zein-Cs-纳米硒乳液并评价其稳定性:当Zein/Cs配比为5:1,Zein-Cs复合物浓度为8%,大豆油/水比例为5:5,VC/Na2SeO3配比为4:1,Na2SeO3浓度为5 mM时,该乳液平均粒径为21.45±0.79μm,Zeta电位高达57.75±2.11 mV,20～40℃、pH 2～7和0～400 mM Na+、Ca2+下,均可维持较高稳定性。（5）纳米硒乳液的贮藏稳定性评价:在28 d内,茶褐素-纳米硒乳液和Zein-Cs-纳米硒乳液保持较高稳定性,普洱茶-纳米硒乳液稳定性最低;4℃比25℃更适合纳米硒乳液的贮藏;Zein-Cs-纳米硒乳液在4℃下呈流体状,25℃下保存14 d后转变为凝胶状。本研究为纳米硒与脂溶性活性物质联用提供了潜在新途径,为纳米硒、茶及其提取物的综合开发利用奠定了理论研究基础。
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