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研究基础:本课题组在前期实验研究中发现mi R-10a-5p表达在急性髓系白血病(acute myelogenous leukemia,AML)患者中较正常人明显升高;miR-10a-5p表达水平在AML患者不同疾病时期存在动态变化:完全缓解期AML患者的miR-10a-5p表达水平较初治组患者下调,而复发AML患者中mi R-10a-5p表达水平较完全缓解期患者上调;阿霉素耐药细胞株HL-60/ADM与其亲本敏感细胞株HL-60相比,miR-10a-5p表达呈显著升高。同时,在初治组中miR-10a-5p高表达组患者一疗程化疗后的完全缓解率低于miR-10a-5p低表达组。AML患者血清表达mi R-10a-5p水平与骨髓细胞表达miR-10a-5p水平呈正相关;初治AML患者中miR-10a-5p高表达者总生存期较短,提示miR-10a-5p可能是AML不良预后的评估分子。研究目的:大量的研究表明在血液系统疾病中,有大量的微小RNA表达异常,部分微小RNA表达异常与NF-κB通路表达异常相关。结合本课题组前期研究结果及NF-κB/p65相关研究结论,本课题进一步研究急性髓系白血病细胞中miR-10a-5p与NF-κB/p65的相互关系,探索miR-10a-5p表达是否可能受NF-κB/p65的活化调控,并讨论其临床意义。方法:2015年1月至2015年10月在我院血液科住院治疗的AML患者,均符合国内AML诊断标准,收集9例患者的骨髓细胞(2例为初治白血病,3例为复发难治白血病,4例为化疗中未缓解的白血病患者;1例为女性患者,8例为男性患者),本研究所有对象或其监护人均签署知情同意书。收集骨髓后,提取单个核细胞,流式细胞仪分选出CD34阳性细胞,进行培养,培养后的细胞,一部分直接检测CD34阳性细胞中的miR-10a-5p的浓度;另一部分用于实验。具体方法为:一部分细胞利用p65活性检测试剂盒检测AML的CD34阳性细胞中NF-κB/p65的活性随着NF-κB/p65激动剂TNF-α浓度及时间改变的变化;并且以NF-κB/p65的抑制剂SN50作用于TNF--α作用后的CD34阳性细胞后再次检测其NF-κB/p65活性的变化;并用QT-PCR法同步检测细胞miR-10a-5p浓度的变化,观察在NF-κB/p65的激动剂TNF-α和抑制剂SN50作用下,AML患者CD34阳性细胞表达NF-κB/p65和miR-10a-5p水平的变化。结果:经过培养后,检测发现miR-10a-5p在AML患者的CD34阳性细胞中较阴性细胞明显高表达;体外AMLCD34阳性细胞,随着TNF-α浓度的增加,检测到NF-κB/p65活性和mi R-10a-5p表达的增加;随着TNF-α作用时间的延长NF-κB/p65活性在第48小时时达到高峰,miR-10a-5p表达在第72小时时达到高峰,miR-10a-5p的表达高峰在NF-κB/p65之后;利用SN50抑制NF-κB通路后,检测到NF-κB/p65和miR-10a-5p的表达都被抑制。结论:AML患者体内中miR-10a-5p的异常表达可能与NF-κB/p65通路调节有关。