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目的：观察肝郁脾虚型IBS模型大鼠海马、下丘脑、结肠组织5-HT、VIP、VIP-R与AQP8的表达变化，以及眼针干预对其影响。从中枢与外周两方面探讨肝郁脾虚型IBS病症结合模型的病理生理学基础，以及眼针干预的生物学效应，为阐明肝郁脾虚型IBS的发生及眼针疗法的干预机制提供实验依据。材料与方法：1. SPF级雄性Wistar大鼠40只，随即选取28只采用“精神刺激+饮食失宜+劳倦”方法建立肝郁脾虚型IBS动物模型。利用11±1℃冷水游泳至力竭（沉入水下10s不浮出）、禁食24h、禁水24h、45℃高温烤箱15min、夹尾5min、电击（30V，电击5s，间歇5s，共进行3min）六种刺激，每日随机选取一种刺激结合自制铁笼束缚1h，共进行3轮即18d。观察大鼠一般状态、体重变化及体重增长率等的变化对模型进行评价，通过评价后选取造模成功的大鼠24只，按照随机数字法分为正常组、模型组及眼针组，每组12只。眼针组造模后采用31号（直径13mm）毫针，针刺大鼠眼眶眶缘上1mm处的下焦区、大肠区、肝区、脾区进行干预7d。2.采用ELISA法检测血清和结肠组织中5-HT、SP和VIP含量。3.采用RT-PCR法检测结肠组织中VIP、VIP-R及AQP8的mRNA表达。4.采用SABC免疫组化法检测海马、下丘脑及结肠中5-HT、VIP和VIP-R的表达并进行分析。结果：1.眼针对肝郁脾虚型IBS模型大鼠一般状态及血清5-HT和SP含量的影响1.1眼针对肝郁脾虚型IBS模型大鼠一般状态的影响造模成功的大鼠，表现为精神萎靡、烦躁、皮毛干枯散乱无光泽、扎堆或蛰伏在角落、明显消瘦、进食减少，大便变软或不成形，排便次数逐渐增多、便质变稀，肛门部多有粪便附着等。肝郁日久，木郁乘土，形成“肝郁脾虚证”表现。经7d针刺治疗后，眼针组大鼠上述情志方面表现有所好转，活动次数、进食量有所增加，排便次数明显减少，便质向正常好转；模型组则无明显变化。与正常组相比，造模结束时（第18d）模型组及眼针组大鼠的体重增长率显著降低（P<0.01），但二者之间差异无统计学意义（P>0.05）；在第25d时，与正常组相比，模型组大鼠的体重增长率显著降低（P<0.01）；与模型组相比，眼针组大鼠的体重增长率显著增加（P<0.01）。与第18d正常组相比，模型组和眼针组大鼠的粪便含水率显著增加（P<0.01），但二者之间无显著无统计学意义（P>0.05）；与第25d正常组相比，模型组和眼针组大鼠的粪便含水率显著增加（P<0.01），与第25d模型组相比，经过眼针干预后粪便含水率显著降低（P<0.01）。1.2眼针对肝郁脾虚型IBS模型大鼠血清5-HT和SP含量的影响与正常组血清相比，模型组和眼针组大鼠血清5-HT含量显著增加（P<0.01），与模型组血清相比，眼针组大鼠血清5-HT含量显著降低（P<0.01）；与正常组大鼠血清相比，模型组大鼠血清SP含量显著增加（P<0.01），与模型组大鼠血清相比，眼针组大鼠血清5-HT含量明显降低（P<0.05）。2.眼针对肝郁脾虚型IBS模型大鼠结肠组织5-HT、VIP、VIP-R及AQP8的影响2.1眼针对肝郁脾虚型IBS模型大鼠结肠组织5-HT含量及表达的影响与正常组结肠相比，模型组与眼针组结肠组织5-HT含量显著增加（P<0.01），与模型组大鼠结肠组织相比，经过眼针干预后其含量显著减少了（P<0.01）。与正常组相比，模型组大鼠结肠组织5-HT的表达显著上调（P<0.01），眼针组大鼠结肠组织5-HT的表达明显上调（P<0.05）；与模型组相比，眼针组大鼠结肠组织5-HT的表达显著下调（P<0.01）。2.2眼针对肝郁脾虚型IBS模型大鼠血清、结肠组织VIP含量及表达的影响与正常组大鼠血清相比，模型组大鼠血清VIP含量显著增加（P<0.01）；与模型组大鼠血清相比，眼针组大鼠血清VIP含量显著降低（P<0.01）。与正常组大鼠结肠相比，模型组与眼针组大鼠结肠组织VIP含量显著增加（P<0.01），与模型组大鼠结肠组织相比，经过眼针干预后其表达显著下调了（P<0.01）。与正常组大鼠相比，模型组大鼠结肠组织VIP mRNA的表达显著上调（P<0.01），眼针组大鼠结肠组织VIP mRNA的表达上调不明显（P>0.05）；与模型组大鼠相比，眼针组大鼠结肠组织VIP mRNA的表达明显下调了（P<0.05）。与正常组相比，模型组结肠组织VIP的表达显著上调（P<0.01），与模型组相比，经过眼针干预后其表达显著下调了（P≤0.01）。2.3眼针对肝郁脾虚型IBS模型大鼠VIP-R表达的影响与正常组大鼠相比，模型组大鼠结肠组织VIP-R mRNA的表达显著上调（P<0.01）；与模型组大鼠相比，眼针组大鼠结肠组织VIP-R mRNA的表达显著下调了（P<0.01）。与正常组大鼠相比，模型组大鼠结肠组织VIP-R的表达显著上调（P<0.01），眼针组大鼠结肠组织VIP-R的表达显著下调（P<0.01）；与模型组大鼠相比，眼针组大鼠结肠组织VIP-R的表达显著下调了（P<0.01）。2.4眼针对肝郁脾虚型IBS模型大鼠AQP8表达的影响与正常组大鼠相比，模型组及眼针组大鼠结肠组织AQP8mRNA的表达显著下调（P<0.01）；与模型组大鼠相比，眼针组大鼠结肠组织AQP8mRNA的表达显著上调了（P<0.01）。与正常组大鼠相比，模型组大鼠结肠组织AQP8的表达显著下调（P<0.01），眼针组大鼠结肠组织AQP8的表达变化不明显，差异无统计学意义（P>0.05）；与模型组相比，眼针组大鼠结肠组织AQP8的表达显著上调（P<0.01）。3.眼针对肝郁脾虚型IBS模型大鼠海马CA3区及下丘脑5-HT、VIP及VIP-R表达的影响3.1眼针对肝郁脾虚型IBS模型大鼠海马CA3区及下丘脑5-HT表达的影响与正常组大鼠海马CA3区相比，模型组大鼠海马CA3区5-HT的表达显著下调（P<0.01）；与模型组大鼠海马CA3区相比，眼针组大鼠海马CA3区5-HT的表达显著上调（P<0.01）。与正常组大鼠下丘脑相比，模型组大鼠下丘脑5-HT的表达有所减少但差异无统计学意义（P>0.05），眼针组大鼠下丘脑5-HT的表达明显上调（P<0.05）；与模型组大鼠下丘脑相比，眼针组大鼠下丘脑5-HT的表达显著上调（P<0.01）。3.2眼针对肝郁脾虚型IBS模型大鼠海马CA3区及下丘脑VIP表达的影响与正常组大鼠海马CA3区相比，模型组大鼠海马CA3区VIP的表达显著上调（P<0.01），眼针组大鼠海马CA3区VIP的表达变化不明显，差异无统计学意义（P>0.05）；与模型组大鼠海马CA3区相比，眼针组大鼠海马CA3区VIP的表达明显下调（P<0.05）。与正常组大鼠下丘脑相比，模型组大鼠下丘脑VIP的表达显著上调（P<0.01），眼针组大鼠下丘脑VIP的表达无显著性变化（P>0.05）；与模型组下丘脑相比，眼针组大鼠下丘脑VIP的表达显著下调（P<0.01）。3.3眼针对肝郁脾虚型IBS模型大鼠海马CA3区及下丘脑VIP-R表达的影响与正常组大鼠海马CA3区相比，模型组和眼针组大鼠海马CA3区VIP-R的表达显著上调（P<0.01）；与模型组大鼠海马CA3区相比，眼针组大鼠海马CA3区VIP-R的表达变化不明显，差异无统计学意义（P>0.05）。与正常组大鼠下丘脑相比，模型组大鼠下丘脑VIP-R的表达明显上调（P<0.05），眼针组大鼠VIP-R的表达变化不明显，差异无统计学意义（P>0.05）；与模型组大鼠下丘脑相比，眼针组大鼠VIP-R的表达显著下调了（P<0.01）。结论：1.本研究采用“精神刺激+饮食失宜+劳倦”方法，成功建立了符合肝郁脾虚型IBS病证结合的动物模型。2.肝郁脾虚型IBS模型大鼠血清5-HT及SP含量显著增加；眼针能够改善肝郁脾虚型IBS模型大鼠的证候；降低血清5-HT及SP含量。3.肝郁脾虚型IBS模型大鼠结肠组织5-HT、VIP及VIP-R的表达明显上调，AQP8的表达下调；眼针干预将其逆转。4.眼针“疏肝健脾”的可能机制之一，是下调结肠组织5-HT、VIP及VIP-R的表达，上调AQP8的表达。5.肝郁脾虚型IBS模型大鼠海马及下丘脑5-HT表达下调，VIP及VIP-R表达上调；眼针干预能够使其逆转。6.海马及下丘脑可能是“肝郁脾虚”证候的中枢反应区之一，5-HT及VIP递质系统参与了肝郁脾虚型IBS的形成。7.眼针的“疏肝健脾”作用之一，是上调海马及下丘脑5-HT表达，下调VIP及VIP-R的表达。