目的1.建立一种理想、实用的慢性脊髓压迫模型,为探索慢性压迫性脊髓损伤(CCSCI)的病理生理机制及其恢复奠定基础。同时于模型L3-L4段脊髓处硬膜下置管,置管处肌肉及皮下固定,延长管部分体外固定并可控性封堵体外延长管管口,以备注射药物使用。2.通过研究紫杉醇(Taxol)对大鼠CCSCI后脊髓组织病理改变、星形胶质细胞增生、胶质瘢痕形成、神经功能恢复情况的作用,初步探讨Taxol对慢性脊髓损伤的保护作用及其可能的机制,为临床治疗提供理论依据。方法1.构建大鼠模型：取健康雌性wistar大鼠56只编号后采用随机数字表法将其分为实验组(n=48)、对照组(C组,n=8),实验组动物于胸9行后路椎板切除,在T8-T10间植入抽屉尾翼钩型(drawer-hook, D-H)脊髓压迫装置。每隔7天将螺钉拧入1周(0.5mm),直至4周,螺钉通过一钢垫片对脊髓施压,每周1次大鼠麻醉后行胸椎正侧位X线片检查,评估装置的位置和胸椎管狭窄程度。对照组的动物只做后路椎板切除,于第4周后行后肢运动功能Basso Beattie Bresnahan(BBB)的评分。手术过程中,出现急性脊髓损伤的动物除外。2.48只已制作成功的大鼠慢性脊髓压迫模型,行鞘内置管模型建立完成后,采用随机数字表法分为Taxol治疗组(A组,n=24)、慢性压迫组(B组,n=24)。A组给予Taxol进行鞘内注射。各组每个时间点8只,分别于慢性压迫性脊髓损伤后14、21、28天进行BBB评分,评价脊髓的功能状态。于第4周选取三组大鼠各2只经过量麻醉后直接处死行TTC染色观察脊髓血运变化。余下的6只取脊髓标本,经病理切片技术行HE、TUNEL及免疫组化染色,观察受压组织的病理变化,检测脊髓中细胞凋亡情况及GFAP在脊髓中的表达情况。进行A组与B组比较,并进行统计学分析。为便于对照,另外取2只正常大鼠,其中1只行TTC染色,1只行病理切片染色。结果1.X线片示压迫装置位置良好,脊髓受压确切。符合后路慢性渐进性压迫模型装置的要求。2.Taxo1治疗组21、28天的后肢运动功能Basso Beattie Bresnahan(BBB)评分均显著优于慢性压迫组(p<0.05)。28d Taxol治疗组与对照组相比,BBB评分无明显降低(P=0.316)。3.TTC染色观察脊髓缺血状况：正常大鼠脊髓断面血运良好；21、28天Taxol治疗组相比慢性压迫组,大鼠脊髓断面脊髓受压侧白质颜色变白区则相对较少。4.脊髓标本HE染色：慢性压迫组脊髓灰质中出现神经元丢失,白质疏松,出现不规则的片状脱髓鞘区,胶质细胞增生。Taxo1治疗14天后,相比于压迫组脊髓形态较为完整,神经元固缩、溶解、坏死减轻,炎症反应较轻。CCSCI后28d,用Taxo1治疗后,脊髓组织结构较为清晰,更多正常的神经元。提示Taxo1可以减少慢性脊髓损伤后胶质瘢痕的形成,有助于再生的轴突穿越胶质瘢痕区,建立新的神经通路和功能联系；通过TUNEL染色证明细胞凋亡阳性数量与压迫时间有正性相关。5.免疫组织化学染色显示：21d Taxol治疗组压迫中心区边缘GFAP染色均不同程度减弱,表达降低,其中,Taxo1治疗组随时间增加,抑制效果越趋增大,说明Taxo1可以抑制脊髓损伤后GFAP表达,削弱胶质瘢痕屏障作用,有利于轴突的再生。慢性脊髓损伤后早期应用Taxo1治疗能抑制损伤区周围脊髓组织GFAP表达的增加。6.21d、28d Taxol治疗组的GFAP阳性细胞数目分别为26.50±2.43、21.33±2.25,慢性压迫组的GFAP阳性细胞数目为35.00±3.16、38.00±5.44,组间有显著差异(p<0.05)。结论1.该装置较好地模拟了慢性渐进性脊髓压迫症的临床特征,是慢性脊髓压迫的较理想、实用的模型,符合后路慢性渐进性压迫模型装置的要求。大鼠鞘内置管模型能减少大鼠的损伤,减少实验动物的需要量,作用效果好。2.Taxo1能够促进CCSCI后大鼠后肢运动功能的恢复；可以抑制损伤部位中间丝蛋白标志物GFAP的生成,减弱星形胶质细胞的反应性胶质化,减少胶质瘢痕形成,削弱了因胶质瘢痕形成给轴突再生造成的物理、化学屏障,Taxol可以抑制炎症反应,改善CCSCI伤后局部的微环境,起到保护神经细胞的作用。