中国成人自身炎症性疾病临床和基因表型谱及自噬的作用初探

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背景:自身炎症性疾病(Autoinflammatory diseases,AUIDs)是由固有免疫失调导致全身炎症反应的疾病,包括单基因AUIDs和多基因AUIDs。我国汉族与国外其他种族、成人与儿童AUIDs在疾病谱、临床表型谱和基因表型谱方面很可能存在不同,目前关于我国成人AUIDs的临床和基础研究极为缺乏。目的:建立我国汉族成人AUIDs的前瞻性队列,并与国外AUIDs、儿童AUIDs的疾病谱、临床表型谱和基因表型谱对比。对确诊成人单基因和多基因AUIDs患者进行随访,建立应用客观指标评价疾病严重程度的模型,观察AUIDs治疗前后疾病严重程度的变化,寻找导致疗效不佳的独立危险因素,并通过血清学指标检测探寻新的反映疾病严重程度的指标。初步探究自噬在成人AUIDs发病机制中的可能作用,探索适合在临床患者中检测细胞自噬功能的实验方法。方法:就诊时年龄≥16岁,符合2010年Kastner教授定义拟诊AUIDs的患者纳入前瞻性观察队列。收集患者入组及随访的人口学信息、临床资料、实验室检查及生物学标本,描述成人AUIDs患者临床特点,并与国外AUIDs和儿童AUIDs进行疾病谱、临床表型和基因表型的比较。采用Mann Whitney检验分析各炎症指标与疾病活动性的关系。采用逐步回归法进行多重线性回归分析,建立由临床症状、炎性指标及SF-36评分组成的评估疾病严重程度的模型。利用新建模型对AUIDs疗效进行评估,采用二分类Logistic回归分析寻找成人Still病(AOSD)传统免疫抑制剂治疗效果欠佳的独立危险因素。使用BD流式液相多重蛋白定量检测技术进行血清多因子检测。使用Western blotting方法对AUIDs患者WBC或外周血单个核细胞(PBMC)进行细胞自噬功能检测。结果:自2015年4月至2017年4月,北京协和医院(PUMCH)风湿免疫科成人AUIDs中心共纳入103例拟诊AUIDs患者,26例(25.2%)诊断单基因AUIDs,61例(59.2%)诊断多基因AUIDs。单基因AUIDs中,中国成人NLRP12自身炎症性疾病(NLRP12-AD)、Blau综合征(BS)比例较国外成人高,而肿瘤坏死因子受体相关周期性综合征(TRAPS)的比例较低。与儿童相比,家族性地中海热(FMF)、高IgD综合征(HIDS)所占比例较低,而NLRP12-AD在儿童中则尚未被发现。中国成人FMF的基因表型谱与日本相近,而与其他种族差异较大。与儿童相比,成人FMF乏力、结膜炎的发生率更高,而关节症状的发生率更低,且成人FMF无一例出现皮疹;成人冷炎素相关周期性综合征(CAPS)皮肤症状的发生率更低;成人周期性发热-阿弗它口炎-咽炎-淋巴结炎(PFAPA)综合征乏力、肌痛发生率更高,咽痛、腹痛的发生率更低。87例单基因或多基因AUIDs中,大部分使用传统免疫抑制剂治疗,少部分应用生物制剂。使用活动性评分作为疾病缓解程度的指标,发现队列中的患者经过治疗后疾病有明显缓解。为更加精确的评估疾病严重程度,利用临床症状个数、CRP和SF-36健康问卷总分3个客观指标建立评估疾病严重程度的模型,将利用该模型计算的结果命名为疾病严重程度指数(disease severity index,DSI)。利用DSI评价单基因和多基因AUIDs的疗效,结果表明应用秋水仙碱和/或激素治疗FMF可以使疾病得到有效缓解;传统免疫抑制剂治疗可以使大部分AOSD患者的病情得到有效缓解,仍有小部分患者效果不佳。通过探究导致疗效差异的危险因素,发现女性、有关节症状、皮疹及淋巴结肿大者,对传统治疗的反应较好,男性、Hgb或RBC水平较高的患者对传统治疗反应较差。使用Logistic回归分析得到传统治疗疗效欠佳的独立危险因素为高RBC水平。检测患者血清学标本的多种炎症细胞因子,发现血清CD54水平和疾病严重程度具有良好的相关性。建立适合在AUIDs患者中检测细胞自噬功能的实验方法,发现尽管差异无统计学意义,活动期AOSD患者PBMC的MDP诱导后自噬活化低于缓解期AOSD和健康对照。利用痛风患者新鲜提取的WBC,可以有效地检测自噬功能。结论:本研究建立了我国汉族成人AUIDs的前瞻性队列,并获得了入组患者人口学基本信息、临床资料及生物学标本。中国成人AUIDs与国外成人AUIDs或儿童AUIDs的疾病谱、基因表型谱和临床表型谱均有不同。建立了利用临床症状个数、CRP和SF-36健康问卷总分3个客观指标评估疾病严重程度的模型。利用该模型评估抗炎和传统非生物免疫抑制剂治疗可以使大部分AUIDs患者病情得到缓解,并进一步找到导致传统治疗效果不佳的AOSD的独立危险因素为高RBC水平。CD54可能成为新的评价疾病严重程度的指标。建立适合在AUIDs患者中检测细胞自噬功能的实验方法。
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