论文部分内容阅读
背景:慢性胰腺炎(CP)是普外科难处理的疾病之一,不同病因所致慢性胰腺炎均以胰腺实质慢性炎症,胰腺体广泛纤维化伴有腹痛和(或)永久性内外分泌功能障碍为基本特征。持续性胰腺腺泡细胞被结缔组织替代最终导致胰腺纤维化是慢性胰腺炎的主要病理变化。目前尚无理想的治疗CP的化学药物,中药因其具有多组分、多靶点、多途径的作用特点在抗纤维化方面展现出优势,显示了良好的前景。
目的:观察黄芪注射液对胰腺纤维化大鼠胰腺组织转化生长因子(TGFβ1),基质金属蛋白酶(MMP-1),金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)的影响结果,探讨黄芪注射液抗胰腺纤维化的疗效及作用机理。
方法:
第一部分、采用大鼠胰胆管内注射2%三硝基苯磺酸(TNBS),制备大鼠胰腺纤维化模型。将72只雄性SD大鼠称重、编号,应用随机数字表将其随机分为模型组和对照组,每组36只,模型组大鼠,胰胆管内注射含2%TNBS的乙醇磷酸盐缓冲溶液0.4ml,对照组给与同体积等体积乙醇磷酸盐缓冲溶液。分别于术后1、2、3、4、5、6周六个时间点,每个时间点称量体重后处死模型组和对照组的各6只大鼠。HE染色病理切片观察纤维化的程度;免疫组织化学检测胰腺组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ,CO-Ⅰ)和转化生长因子β1(transforming growth factorbeta-1,TGFβ1)表达情况。
第二部分、模型制造成功后取50只雄性SD大鼠,体重位于220~250g,随机分为5组,每组10只:对照组(A组)、模型组(B组)、黄芪注射液治疗组(C、D、E组),黄芪注射液治疗分为3个剂量组:分别为400mg/kg(低剂量组,C组)、800mg/kg(中剂量组,D组)、1600mg/kg(高剂量组,E组)连续肌肉注射4周,而对照组则给予同体积的生理盐水。4周后称量体重后处死大鼠取标本检测。HE染色病理切片观察纤维化的程度;免疫组织化学检测胰腺组织中TGF-β1、MMP-1、TIMP-1的含量。
结果(一):
采用大鼠胰胆管内注射2%TNBS能够制造稳定的大鼠慢性胰腺炎模型,成模时间在4周时较为典型。
结果(二):
与对照组比较,模型组大鼠胰腺组织TGFβ1、TIMP-1的表达增强,有显著性差异(P<0.01);MMP-1的表达无统计学意义(P>0.05);黄芪注射液高、中、低剂量组分别与模型组比较,胰腺组织MMP-1的表达明显增加,而TIMP-1的表达明显减少,均有显著差异(P<0.01);黄芪注射液高、中剂量组与对照组、低剂量组比较,TGFβ1、TIMP-1、MMP-1的表达量具有统计学意义(P<0.05);黄芪注射液高剂量组与中剂量组相比较,三者之间无统计学意义(P>0.05)。
结论:
1.本实验成功地复制了大鼠慢性胰腺炎的模型。
2.黄芪注射液可以增强胰腺纤维化组织MMP-1的表达,抑制TIMP-1的表达,同时降低胰腺纤维化组织中TGFβ1含量,从而能够促进胰腺内ECM的降解,因此对胰腺纤维化的治疗有确切的疗效。
3.黄芪注射液对胰腺纤维化的治疗有一定的量效范围。