目的:研究mi R-21负向调控PDCD4在人肾癌细胞系中的机制,观察其对肾癌细胞增殖的影响,探讨mi R-21和PDCD4的生物学功能,并对其作用机理做更深入的研究,为肾癌靶向治疗提供新靶点,改善肾癌患者的预后。方法:使用实时荧光定量PCR和westen blot检测人正常肾近端小管上皮细胞系HK-2和人肾透明细胞癌细胞系769-P中mi R-21和PDCD4的基因和蛋白表达差异,体外合成mi R-21inhibitor和mi R-21mimic,采用脂质体转染的方法导入肾癌769-P细胞系中,应用实时荧光定量PCR检测转染后PDCD4的m RNA水平;应用Western blot检测转染后PDCD4基因蛋白表达;应用EDU法及集落形成实验观察其对769-P细胞增殖的影响。结果:miR-21在正常肾近端小管上皮细胞中的表达明显低于肾癌细胞系,然而PDCD4蛋白表达却显著高于肾癌细胞系,同时,PDCD4 m RNA在两者之间却没有差异;抑制mi R-21后PDCD4 m RNA和对照组相比无明显变化,而mi R-21基因抑制后PDCD4蛋白表达增高。沉默mi R-21后对769-P细胞的生长具有显著的抑制作用,集落形成能力明显下降,而增强mi R-21表达后再出现相反现象。结论:在这项研究中,我们观察到在肾癌细胞中mi R-21和PDCD4存在一种负向调控关系,说明mi R-21不仅促进肾癌细胞增殖,而且与肾癌发生、侵袭和转移关系密切。用瞬时转染及RNA干扰技术沉默或下调mi R-21表达,出现肾癌细胞的生长及增殖被抑制现象,表明mi R-21与肾癌的发生发展关系密切,在一定程度上起到了一个癌基因的作用;mi R-21沉默后,PDCD4的m RNA水平没有明显变化,而其蛋白表达水平显著提高,表明mi R-21基因可能通过转录后水平作用于PDCD4;mi R-21基因下调后,可使PDCD4的蛋白翻译受到抑制,显示出了基因靶向治疗的效果,因此,mi R-21可作为肾癌靶向治疗的新靶点为肾癌临床治疗提供了依据和方向。