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目的钠离子通道是由聚合蛋白形成的细胞膜结构,中间含有允许钠离子通过的亲水性孔道。通过控制钠离子流进或流出细胞,从而引起细胞的除极化和超极化,完成信号的跨膜传递,与机体内环境恒定的维持密切相关。国外曾经研究报道了电压门控性钠离子通道(VGSCs)也存在于一些肿瘤细胞(如乳腺癌,前列腺癌等),本研究通过RT-PCR技术检测宫颈活检组织中Na_v1.7mRNA的表达水平,探求Na_v1.7mRNA与宫颈癌变的关系及放化疗对Na_v1.7的影响。材料与方法一、实验材料1、标本取自中国医科大学附属第一医院妇科2007年5月至2008年11月宫颈活检及术前未经治疗手术切除之标本,经病理证实的宫颈鳞癌标本60例,其中10对为同一病人治疗前和经放化疗2周时的先后取材,另取同期我科因子宫肌瘤行子宫切除术,术后经病理证实的正常宫颈组织标本10例。收集宫颈鳞癌患者的临床病理资料进行统计学分析,包括:病理分级、临床分期、年龄、治疗前后。2、试剂RNAiso Reagent(Total RNA提取试剂),TaKaRa RNA PCR Kit(AMV)Ver3.0,Na_v1.7、β-actin上游及下游特异性引物,琼脂糖凝胶电泳所需试剂。二、实验方法RT-PCR技术三、结果判定Na_v1.7 mRNA通过PCR仪扩增后,行琼脂糖凝胶电泳,紫外灯下观察结果,并通过测量灰度值对其进行半定量分析。四、统计学处理所有数据资料用SPSS13.0进行处理,各组计量资料的结果采用t检验,P<0.05有统计学意义。结果1、Na_v1.7 mRNA在正常宫颈组织和宫颈癌组织中的表达Na_v1.7 mRNA在正常宫颈组织中不表达,在宫颈癌组织中表达的灰度值平均值为1.6403相比,有显著性差异。2、Na_v1.7 mRNA表达与宫颈癌临床病理特征间的关系Na_v1.7 mRNA在高分化癌中表达为0.9601、中分化为0.9918,与低分化的1.9014相比,有显著性差异(P<0.05)。Na_v1.7 mRNA在宫颈癌Ⅰ-Ⅱ期中表达为0.9867,在宫颈癌Ⅲ-Ⅳ期中表达为1.8993,两者有显著性差异(P<0.05)。Na_v1.7mRNA的表达与患者的年龄无统计学意义(P>0.05)。3、Na_v1.7 mRNA在宫颈癌放化疗前后组织中的表达情况Na_v1.7 mRNA在放化疗前的宫颈癌组织中表达为1.4010,与放化疗后的0.3001相比,有显著性差异(P<0.01)。结论1、Na_v1.7基因参与宫颈癌细胞增殖。2、Na_v1.7基因表达水平与宫颈癌的临床分期及病理分级呈正相关,与宫颈癌的恶性进展及预后有关。3、Na_v1.7基因的表达水平在宫颈癌放化疗后明显降低。