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研究背景：环氧化酶（cyclooxygenase，COX）又称前列腺素内过氧化合成酶（prostaglandin endoperoxide synthase），是前列腺素生成过程中的一种关键酶，有COX-1和COX-2两个亚型。COX-1为结构型酶，在大多数正常细胞中都呈稳定表达，被视为看家基因，具有多种生理功能，如保护胃粘膜、调节肾血流和血小板聚集等功能；COX-2为诱导型酶，静息时一般不表达，只有在细胞因子、生长因子及致癌物质等诱导下才迅速合成，表达显著增高，促使前列腺素类物质（prostaglandins，PGs）的合成，参与炎症反应等过程。近几年来，国内外一些研究发现在胃癌、结肠癌、肺癌和膀胱癌等恶性肿瘤中COX-2表达升高，表明COX-2过表达与肿瘤的发生、发展有密切关系。而另有一些临床和流行病学的研究则表明，非甾体类抗炎药物（nonsteroidal anti-inflammatory drugs，NASIDs）能抑制一些肿瘤如家族性腺瘤性息肉病的生长，并使人们患结肠癌和其它胃肠道肿瘤的机率降低，从而提出了NSAIDs防治恶性肿瘤的新设想。 前列腺癌（prostate cancer,PCa）是美国等西方发达国家中男性常见的恶性疾病之一，也是癌性死亡的常见原因之一。近年来，随着我国人民群众生活水平的提高，生活方式的改变和平均寿命的延长，前列腺癌的发病率逐年增加，越来越多的前列腺癌患者被诊断出来，因此，探讨前列腺癌的发病机制和寻找有效的治疗方法是非常有意义的。已有一些研究表明COX-2及其抑制剂与前列腺癌相关，但迄今为止，COX-2过表达与前列腺癌等恶性肿瘤发生、发展之间的具体分子机制及选择性COX-2抑制剂抗肿瘤效应的具体机制尚无明确结论，各种研究方兴未艾。 本研究采用原位核酸分子杂交、免疫组织化学（SABC）法、Western blot法和酶联免疫吸附竞争法（ELISA）等方法首次研究了人雄激素非依赖性前列腺癌PC-3m细胞系中COX-2基因与蛋白质表达，PGE2释放以及COX-2选择性抑制剂celecoxib对COX-2蛋白质活性和肿瘤细胞生长的影响，并结合对PC-3细胞系的研究结果，探讨COX-2、PGE2与前列腺癌这三者之间，COX-2过表达与PC-3m细胞系较PC-3博士学位论文 中文摘要细胞系具有更强侵袭性和转移性之间的相关性，以及选择性COX－2抑制剂对前列腺癌细胞的作用效果，为临床上前列腺癌的化学治疗和化学预防提供新的理论和新的方法。 第一章COX《基因在人雄激素非依赖性前列腺癌 PC—3禾 PC－3m细胞中的表达及意义 目的：研究COX－2基因及其蛋白质在人雄激素非依赖性前列腺癌PC－3和PC－3m细胞中的表达，分析COX－2与前列腺癌发生发展之间的关系，探讨COX－2过表达与PC上m细胞系较PC上细胞系更具侵袭性和转移性之间的相关性。 方法：以PC上和PCIm细胞系为研究对象，分别利用原位核酸分子杂交，免疫组织化学pABC)法和 Western blot法检测 COX2基因及其蛋白质在 PCl和PC－3m细胞中的表达。 结果：1)PC3和 PCIm细胞中均有 COX上 InRNA的表达，二者染色强度差异不明显。 2)PCl和PC上m细胞中均有COXq和COX上蛋白质表达。 3)PCl和PCIm细胞中 COX工蛋白质表达较COXl蛋白质表达明显，PC习。细胞中COX一二蛋白质的表达量较PC－3细胞蛋白质的表达量稍低。 结论：l)同 PC上细胞系一样，PC上m细胞系中存在 COX1 mRNA及蛋白质表达。 2)COX2过表达与人前列腺癌的发生、发展有关。 3)COX上蛋白质的表达量与PC上m细胞系较PCl细胞系具有更强侵袭性和转移性无相关性。