大黄酸抑制气管平滑肌收缩的作用和机制研究

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目的:从植物中寻找抑制气道平滑肌收缩的物质并阐明其机制。方法:通过肌张力实验观察大黄酸对80 mM K+(High-K+)和100μM乙酰胆碱(ACh)诱导的小鼠气管环预收缩作用;利用全细胞膜片钳技术和单细胞钙成像分别检测大黄酸对气管平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)L型电压依赖性钙通道(L-type voltage-dependent Ca2+channel,LVDCC)和钙库调控钙通道(store-operated Ca2+channel,SOCC)的电流和对Ca2+内流的的影响。结果:我们发现番泻叶乙醇部(ethyl alcohol extract of Cassia angustif olia Vahl,EECV)具有抑制小鼠气道平滑肌(ASM)预收缩的作用。其中的单体大黄酸也具有同样的抑制作用。177.8μM的大黄酸可分别抑制由ACh和High-K+引起的平滑肌预收缩。ACh诱导的预收缩可被硝苯地平(nifedipine,L型电压依赖性钙通道选择性抑制剂)和YM-58483(钙库操纵性钙通道特异性抑制剂)部分抑制;硝苯地平和YM-58483分别抑制L-型电压依赖性钙通道(L-type voltage-dependent calcium channel,LVDCC)电流和钙库操纵性钙通道(store-operated calcium channel,SOCC)电流,这些通道电流也能被大黄酸所抑制;大黄酸降低ACh和High-K+引起的细胞内钙升高。此外,在无外钙条件下,ACh诱发了一过性的收缩反应,而High-K+未触发收缩,当加入2 mM钙后,均观察到了强烈的收缩反应,而且,这种收缩反应被大黄酸显著抑制。结论:大黄酸抑制LVDCC和SOCC,降低细胞内钙,舒张气道平滑肌。为此,番泻叶中的大黄酸可用于开发成气管舒张剂。
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