巯基蛋白酶水解人全唾液的效率和影响因素

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目的:探讨三种巯基蛋白酶(菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶和无花果蛋白酶)在不同盐浓度、pH值和温度环境中水解人全唾液生物膜的效率。方法:收集非刺激性的人全唾液(whole saliva, WS),采用消散因子石英晶体微天平(QCM-D)在体外原位、实时和动态监测人非刺激性全唾液在Au石英晶体芯片形成生物膜,用菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶和无花果蛋白酶在不同盐浓度、pH值和温度环境中水解唾液生物膜。采用3倍频和归一化方法记录频率改变(△F)和能量消散因子改变(△D)随时间的变化。用分析软件计算膜的质量减小量(△m)和厚度减小量(△h)。通过△m和△h评价蛋白酶水解唾液生物膜的效果。结果:菠萝蛋白酶在盐浓度0.001~0.01 M时,△m和△h无明显变化,高于0.01 M时,△m和△h随着盐浓度的升高而减小。木瓜蛋白酶和无花果蛋白酶分别在盐浓度为0.005 M和0.05 M时,△m和△h最大,水解效率最高,低于或高于该盐浓度,水解效率都降低。随着pH值的升高,菠萝蛋白酶的△m和△h减小,水解效率降低,即pH 5.9>pH 6.9>pH 7.9(P<0.05);无花果蛋白酶的△m和△h增加,水解效率升高,即pH 5.9<pH 6.9<pH 7.9(P<0.05);木瓜蛋白酶则受pH值的影响较小,在pH 5.9时较高。随着温度的升高,三种蛋白酶的△m和△h都增加,水解效率升高,都在35℃时最大。结论:三种巯基蛋白酶水解人全唾液生物膜的效率都受到盐浓度、pH值和温度的影响;三种蛋白酶之间水解效率不同,无花果蛋白酶在中性和碱性环境中水解效率最高,菠萝蛋白酶则在酸性环境下水解效率最高。
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